兔腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒品牌Rabbit Tumor necrosis factor α /TNFα ELISA Kit【實驗用途】Tumor necrosis factor α,TNFα,腫瘤壞死因子α。TNFα前體是以跨膜蛋白的形式存在于細胞內(nèi),在細胞外被剪切成17KDa的成熟形態(tài)(157個氨基酸)?;钚缘腡NFα以非共價鍵二聚體、三聚體甚至五聚體的形式存在,但在SDS-PAGE顯示為單一17KDa條帶。很多細胞都能合成TNFα,包括各種免疫細胞(單核細胞、巨噬細胞、T、B細胞、粒細胞、NK細胞)和非免疫細胞(上皮細胞、纖維細胞、肌細胞、Kuppfer細胞等)。TNFα的合成受到很多因素的影響。其生理功能早認為是有抗腫瘤活性,現(xiàn)在已明確不僅能調(diào)節(jié)腫瘤細胞的生長,對很多細胞的生長、分化和代謝都有影響。TNFα是免疫宿主反應的快速反應因子。其另一特點是在免疫疾病中理性作用。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑(ELISA)。預先包被的兔TNFa抗體為多克隆兔TNFa抗體。檢測相兔TNFa抗體也為多克隆兔TNFa抗體,經(jīng)(biotin)標記。樣品標記兔TNFa抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。。 試劑配制: 1、兔腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒品牌酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。 2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。 3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。 4、標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。 5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。 6、標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100) 7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100) 8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。 兔腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒品牌Rabbit Tumor necrosis factor α /TNFα ELISA Kit 產(chǎn)品名稱 | 兔腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒品牌 | 英文名稱 | Rabbit Tumor necrosis factor α /TNFα ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
 樣本處理及要求: 1.兔腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒品牌血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。 仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。 2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。 5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融. 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 注意事項: 1.兔腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒品牌試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。 2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。 3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6. 底物請避光保存。 7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準. 8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 9. 本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。 1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。 2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。 3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。 4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6. 底物請避光保存。 7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準. 8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 9. 本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。 以下是兔腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒品牌的相關產(chǎn)品,點擊了解更多其它elisa檢測試劑盒。 人抗天然脫氧核糖核酸抗體 n-DNA-Ab 規(guī)格:48T/96T
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