小鼠腦膜細(xì)胞提取物【Mouse Brain: Normal Meningeal Cells Derivatives】 小鼠腦膜細(xì)胞提取物是從小鼠原代腦膜細(xì)胞提取的,小鼠原代腦膜細(xì)胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 小鼠腦膜細(xì)胞提取物說明書 | 英文名稱 | Mouse Brain: Normal Meningeal Cells Derivatives | 貨號 | EYX99194 |

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
 操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 金黃色葡萄球菌腸毒素B(SEB)單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒4817-Acetyloxy-chloroα-chloromethylpregna,6-diene,-dione171838醋酸環(huán)丙氯地孕酮 A組鏈球菌單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒4817-Hydroxya,2a-methylenepregna,6-diene,-dione acetate2 流感嗜血桿菌單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒484-(Phenylthio)benzyl alcohol63176 肺炎鏈球菌單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Fenticonazole nitrate731519硝酸芬替康唑 嗜肺軍團(tuán)菌單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒482-Fluoroadenosine1468 humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit 人0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane 中文名:2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷 分子式:C17H14Cl2O4 度:98.0% HumanPeussioxin,PTELISAKit人百日咳(PT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,5-Pentanediol diacrylate 中文名: 分子式:C11H16O4 Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,5,15-Tri-O-methylmorindol 942609-65-6 中文名: 分子式:C18H16O6 HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene 中文名:1,4-雙(5-苯基-2-惡唑基)苯 分子式:C24H16N2O2 HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 18-Hydroxytritriacontan-16-one 中文名: 分子式:C33H66O2 度:98.0% 五味子酯乙 HPLC≥98% 20mg Humanhemoglobin-advancedglycosylationendproducts,Hb-AGEELISAKit 人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 西貝母堿 HPLC≥98% 20mg Humanheparansulfate,HSELISAKit 人硫酸類肝素(HS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 西貝母堿苷 HPLC≥98% 10mg Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISAKit 人硫酸肝素糖蛋白(HSPG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 西伯利亞遠(yuǎn)志口山酮B HPLC≥98% 20mg HumanHerpessimplexvirus,HSV-Ag1ELISAKit 人單皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 西伯利亞遠(yuǎn)志糖A HPLC≥98% 20mg HumanHerpessimplexvirusⅠaibody,HSVⅠ-AbELISAKit 人單皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 西伯利亞遠(yuǎn)志糖A HPLC≥95% 20mg humanherpesvirusesRFLP基因分析試劑盒20 西紅花苷 鑒別 20mg HumanHexokinase,HKELISAKit 人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 西紅花苷I HPLC≥98% 20mg Humanhistatin5ELISAKit 人富組蛋白(histatin5)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 西紅花苷II HPLC≥98% 20mg HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 西紅柿堿 HPLC≥98% 10mg HumanIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISAKit 人缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 小鼠腦膜細(xì)胞提取物說明書熱休克蛋白 27(HSP27) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Panaxydiol 中文名: 分子式:C17H24O2 曲拉通X-100 100ml 3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 中文名:3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0% 羥自由基檢測 Hydroxyl radical detection Rasagiline mesylate 中文名:甲磺酸雷沙吉蘭 分子式:3S 羥脯酸測試前處理試劑 Preeatme reage hydroxyproline test Rengynic acid 中文名: 分子式:C8H14O4 羥脯酸(Hyp)測試盒 Glamine syhetase (GS) test kit Rengynic acid 517883-38-4 中文名: 分子式:C8H14O4 |