大鼠支氣管成纖維細(xì)胞提取物【Rat Airway: Normal Bronchial Fibroblast Derivatives】

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞提取物是從大鼠支氣管成纖維細(xì)胞提取的，大鼠支氣管成纖維細(xì)胞從正常大鼠支氣管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

己烯雌酚Elisa檢測(cè)試劑盒96Allyl phenoxyacetate74934苯氧乙酸烯丙酯

依維菌素Elisa檢測(cè)試劑盒962-Allylphe74512-烯丙基酚

醋酸甲羥孕酮Elisa檢測(cè)試劑盒962-Amino'-chloro-nitro benzophenone1162-氨基-硝基'-氯二苯甲酮

19-去甲睪酮Elisa檢測(cè)試劑盒966-Chloroguanine riboside04/7/16-氯鳥嘌呤核苷

孕酮Elisa檢測(cè)試劑盒96價(jià)格：￥1 / 5 mg中文名：4-(1H,2,4-三氮唑-基甲基)苯胺別名：
HumanEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISA試劑盒人內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (R)-4-Methoxydalbergione  中文名：(R)-4-甲氧基黃檀醌  分子式：C16H14O3 

HumanEndotheliallipase,ELELISA試劑盒人內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  78606-95-9  中文名：(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式：C17H21NO 

HumanEndostatin,ESELISA試劑盒人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone  中文名：(S)-(+)-4-芐基-3-丙酰-2-惡唑烷酮  分子式：C13H15NO3 

Humanendomorphin-2,EM-2ELISA試劑盒人內(nèi)肽-2(EM-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  90719-32-7  中文名：(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮  分子式：C10H11NO2 

HumanEndomeiumAibody,EMAbELISA試劑盒人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  (S)-4-Methoxydalbergione  中文名：(S)-4-甲氧基黃檀醌  分子式：C16H14O3
外消旋西替利嗪N氧化物（非對(duì)映）  rac Cetirizine N-Oxide(Mixture of Diastereomers)  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatDHEA-SELISAKit大鼠去氫表雄同(DHEA-S)規(guī)格：96T/48T

(3R,5S)氟伐他汀鈉鹽  (3S,5R) Fluvastatin  Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱Ratdihy-drotestosteroneELISAKit大鼠雙氫睪同(DHT)規(guī)格：96T/48T

(3R,5S)-氟伐他汀鈉鹽  (3R,5S)-Fluvastatin  Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱Ratdihy-drotestosteroneELISAKit大鼠雙氫睪同(DHT)規(guī)格：96T/48T

氟伐他汀  Fluvastatin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatdopamineELISAKit大鼠多巴胺(dopamine)規(guī)格：96T/48T

克林沙星鹽酸鹽  Clinafloxacin Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatdopamineELISAKit大鼠多巴胺(dopamine)規(guī)格：96T/48T

4-羥基左旋咪唑  4-Hydroxy Levamisole  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatDPDELISAKit大鼠脫氧吩(DPD)規(guī)格：96T/48T

氯米帕明N氧化物  Clomipramine N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatDPP4ELISAKit大鼠二肽基肽酶IV(DPP4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-去甲基氯米帕明鹽酸鹽  N-Desmethyl Clomipramine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatEndotheliallipaseELISAKit大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯吡格雷  Clopidogrel  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatEndotheliallipaseELISAKit大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯吡格雷標(biāo)記d4  Clopidogrel Labeled d4  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatEndothelialniicoxidesyhase3ELISAKit大鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)規(guī)格：96T/48T
大鼠支氣管成纖維細(xì)胞提取物價(jià)格人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit                 Capecitabine  中文名：卡培他濱  分子式：C15H22FN3O6 

人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit     Tigecycline  中文名：  分子式：C29H39N5O8 

人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISAKit     Tigogenin  77-60-1  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  毛地黃屬; 萬(wàn)年蘭屬; 螺甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISAKit                 Tigogenin  77-60-1  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3 

人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISAKit     Tigogenin  中文名：劍麻皂素  分子式：C27H44O3