人胚胎滋養(yǎng)層組織提取物【Human Placental：Normal Placenta Trophoblast Derivatives】

胚胎滋養(yǎng)層是母親子宮內膜和發(fā)育中胚胎之間的營養(yǎng)通路。緊貼在子宮壁的滋養(yǎng)層是胚胎著床*的步驟，隨后形成胎盤。公司科技提供來自新鮮或冷凍人胚胎滋養(yǎng)層組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

Western及IP細胞裂解液   0 ml4-Aminophenylacetic acid119754-基乙酸

Western一抗稀釋液   0ml4-Amino-N-methylphthalimide24-氨基-N-甲基

電轉濾紙 薄  4-Amino-N-methylbenzamide627424-氨基-N-甲基苯甲酰胺

紅細胞裂解液   1 ml4-Aminohippuric acid6184-氨基馬尿酸

麗春紅染色液   0 ml4-Aminobutyric acid1956/12/24-氨基丁酸
Escitalopram oxalate  219861-08-2  中文名：草酸西酞普蘭  分子式：C22H23FN2O5    兔6前列腺素F1aelisa試劑盒   兔6前列腺素F1a試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔6前列腺素F1a試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔6前列腺素F1a試劑盒、兔6前列腺素F1a elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Deferasirox  201530-41-8  中文名：地拉羅司  分子式：C21H15N3O4    兔白介素-6(rabbit IL-6)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Ilaprazole  172152-36-2  中文名：艾普拉唑  分子式：C19H18N4O2S    兔白介素-8(rabbit IL-8)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Ivermectin B1a  71827-03-7  中文名：依維菌素  分子式：C48H74O14    兔白介素-10(rabbit IL-10)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Neutral berberine sulfate  316-41-6  中文名：硫酸黃連素  分子式：C20H20NO8S    兔白介素-12(rabbit IL-12)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝
三氯蔗糖 HPLC≥98% 20mg HumahymosinELISAKit人胸腺肽(Thymosin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三七素 HPLC≥98% 20mg Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人胸腺活化調節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三七皂苷FC HPLC≥98% 20mg Humahymusexpressedchemokine,TECKELISAKit 人胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

三七皂苷Fe HPLC≥98% 20mg Humahymus-leukemiaaigen,TLaELISAKit 人胸腺白血病抗原(TLa)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

三七皂苷Ft HPLC≥98% 20mg humahyroid-stimulatinghormonereceptoraibody,TSHRELISAKit 人促甲狀腺激素受體抗體(TSHR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

三七皂苷R HPLC≥98% 20mg humahyroidstimulatingimmunoglobulin,TSIELISAKit 人甲狀腺刺激球蛋白(TSI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

三七皂苷R(R型) HPLC≥98% 20mg Humahyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit人甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三七皂苷R(S型) HPLC≥90% 20mg Humaissuefactor，IFELISAKit人組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三七總皂苷 HPLC≥70% 20mg Humaissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三十烷醇 GC≥98% 20mg Humaissueinhibitorofmetalprotease1，TIMP-1ELISAKit人基質金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人胚胎滋養(yǎng)層組織提取物價格兔緊張素II(rabbit Angiotensin-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  1068661-35-7  中文名：6,6'- 二芥子?；崽?/span>  分子式：C34H42O19 

兔緊張素Ⅱelisa試劑盒   兔緊張素Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔緊張素Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔緊張素Ⅱ試劑盒、兔緊張素Ⅱ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     5-Benzyloxyindole  中文名：5-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO 

兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒              5-Benzyl-1H-tetrazole  中文名：5-芐基-1H-四唑  分子式：C8H8N4O 

兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit     5-O-Ethylcleroindicin D  中文名：  分子式：C10H16O4  度：%

兔心脂肪酸結合蛋白(rabbit H-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式：C9H10N2S

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。