大鼠腎小球組織提取物【Kidney:Normal Rat Glomerular Derivatives】

腎小球?yàn)檠哼^濾器，腎小球毛細(xì)血管壁構(gòu)成過濾膜。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠腎小球組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

5ml吸頭(用于大龍，百得，Eppendorf移液器)0支/包4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate34797N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-芐脂

5ml吸頭盒1-Benzoylpiperazine1375481-苯甲酰

5ml圓底連蓋離心管0個/包 4-Benzoyloxy-azetidinone2856284-苯甲酰氧基-氮雜環(huán)丁酮

5ml圓底連蓋棕色離心管0個/包 2,2-Bis(3-amino-hydroxyphenyl)hexafluoropropane8355872,2-雙(3-氨基-羥苯基)六氟丙烷

6孔植物水培盒4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide8384654-苯甲酰'-甲基二苯硫醚
Cefotaxime   中文名：頭孢噻肟鈉  分子式：C16H17N5NaO7S2    豬圓環(huán)病毒2型抗體ELISA檢測試劑盒  

Cefixime  中文名：頭孢克肟  分子式：C16H15N5O7S2    豬乙型腦炎病毒抗體IgGELISA試劑盒   48T/96T   試劑盒   組裝/原裝

Cefcapene pivoxil hydrochloride  中文名：鹽酸頭孢卡品酯  分子式：C23H32ClN5O9S2    豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒  

Caudatin  中文名：告達(dá)庭  分子式：C28H42O7    豬乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒           

Catalponol methylthiomethyl ether  中文名：  分子式：C17H22O2S    豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T
馬尾柴酸 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin8,IL-8ELISAKit大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

喇叭茶醇 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin8,IL-8ELISA試劑盒大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

愈創(chuàng)木素 HPLC≥98% 20mg RatIerleukin9,IL-9ELISAKit大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

黃獨(dú)素D HPLC≥95% 20mg RatIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒大鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

重樓皂苷VII HPLC≥95% 20mg Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

竹葉椒堿 HPLC≥95% 20mg Ratiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA試劑盒大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

槐定堿 HPLC≥98% 20mg RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(EM-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

齒孔醇 HPLC≥95% 20mg Ratiglyceride,TGELISAKit大鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

桑辛素 C HPLC≥95% 20mg Rati-iodothyronine,T3ELISAKit大鼠*狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

桑辛素 D HPLC≥95% 20mg RatImmunoglobulinA,IgAELISAKit大鼠球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠腎小球組織提取物細(xì)胞毒 T 細(xì)胞相關(guān)抗原 4(CTLA-4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Araliadiol  1354638-93-9  中文名：  分子式：C15H20O2  度：%  關(guān)鍵詞：  抗癌; 食用土當(dāng)歸; 聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

細(xì)胞凋亡抑制因子BCL-2   英文名稱：   Cell appoptosis inhibitory BCL-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BCL-2  Antipyrine  60-80-0  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O  度：99.0%   

細(xì)胞凋亡相關(guān)基因 -2(BCL-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender  Anthraquinone-2-carboxylic acid  117-78-2  中文名：蒽醌-2-羧酸  分子式：C15H8O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒   100次  Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  853-35-0  中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽  分子式：C14H6Na2O8S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

細(xì)胞凋亡（TdT介導(dǎo)的原位末端切口平移雙標(biāo)記法）檢測   Vitamin E (VE) detection  Averantin  中文名：  分子式：C20H20O7  度：%

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。