大鼠表皮組織提取物【Skin: Normal Rat Epidermal Derivatives】

表皮組織是由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍大鼠表皮組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

ml平底螺口離心管(國(guó)產(chǎn))個(gè)/袋Benzyl carbazate53313肼基甲酸芐酯

ml圓底插口離心管(國(guó)產(chǎn))25個(gè)/包 5-Benzoylpentanoic acid414425-苯甲酰基戊酸

ml圓底螺口高速離心管 PP6個(gè)/包 7-Benzyloxyindole28977-芐氧基吲哚

ml圓底內(nèi)螺口離心管(國(guó)產(chǎn))個(gè)/包 N-Benzylcinchonidinium chloride692574N-化辛可寧丁

mm微孔濾膜(國(guó)產(chǎn)，0.22μm/0.45μm)4,4'-Biphenyldicarboxylic acid784,4'-二甲酸
Catalpalactone  1585-68-8  中文名：  分子式：C15H14O4  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒  

Carvedilol  72956-09-3  中文名：卡維地洛  分子式：C24H26N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒  

Cardenolide B-1  1318158-89-2  中文名：  分子式：C30H44O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠尿蛋白（UP）ELISA試劑盒           

Carbasalate calcium  5749-67-7  中文名：卡巴匹林鈣  分子式：C19H18CaN2O9  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體   英文名稱：   urokinase-plasmingen activator receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   uPA-R

Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate  921769-65-5  中文名：卡培他濱  分子式：C16H20FN3O7  度：98.0%      小鼠超敏感度促甲狀腺素   英文名稱：   Mouse ulasensitive Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   U.TSH
氯美扎酮（標(biāo)準(zhǔn)品）  Chlormezanone  質(zhì)量規(guī)格：UV法溶出度檢查 小鼠內(nèi)(ET)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseendotoxin,ETELISAKit 96T/48T

氫鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）  Calcium hydrogenphosphate dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定 小鼠內(nèi)(ET)ELISA試劑盒 ，英文名： ET ELISA Kit

磺胺二甲嘧啶 （標(biāo)準(zhǔn)品）  Sulfamethazine  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 96T/48T

磺胺脒（標(biāo)準(zhǔn)品）  Sulfaguanidine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 ，英文名： EG-VEGF ELISA Kit

芬布芬（標(biāo)準(zhǔn)品）  Fenbufen  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠腺來(lái)源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 ，英文名： EG-VEGF ELISA Kit

曲克蘆?。?biāo)準(zhǔn)品）  Troxerutin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠內(nèi)磺肽α(ENSα)ELISA試劑盒 ，英文名： ENSα ELISA Kit

二羥丙茶堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Diprophylline  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠內(nèi)凝集蛋白1(ITLN1)ELISA試劑盒 ，英文名： ITLN1 ELISA Kit

鹽酸地巴唑（標(biāo)準(zhǔn)品）  Bendazol hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠內(nèi)皮素1(EDN1)ELISA試劑盒 ，英文名： EDN1 ELISA Kit

氯喹（標(biāo)準(zhǔn)品）  Chloroquine diphosphate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 ，英文名： ET-1 ELISA Kit

鹽酸異丙嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）  Promethazine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 小鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)ELISA試劑盒 ，英文名： ECE1 ELISA Kit
大鼠表皮組織提取物培養(yǎng)蝦特定基因序列(FC)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T  Aspergillon A  2239299-08-0  中文名：  分子式：C22H32O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

蝦特定基因序列(FC)核酸檢測(cè)試劑盒   48T  Aspergillon A  2239299-08-0  中文名：  分子式：C22H32O 

蝦胺/酚   英文名稱：   Octopamine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   OPM  Aspartame  22839-47-0  中文名：阿司帕坦  分子式：C14H18N2O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>)   48T  Artesunate  88495-63-0  中文名：青蒿琥酯  分子式：C19H28O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測(cè)試劑盒   48T  Artesunate  88495-63-0  中文名：青蒿琥酯  分子式：C19H28O8

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。