參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱：B Virus(BV)B
貨號：EY-P6401

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 正胺shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  人β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
酵母聚糖A(2-8℃ )NA  兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)免疫試劑盒 Rabbit Crosslaps ELISA Kit
硅氧，英文名或英文縮寫：Silicon dioxide，級別：GR，99.8%，規(guī)格：10克  殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)ELISA試劑盒 ，英文名： KLR ELISA Kit
孔雀石綠 Malachite Green Carbinol base,90% 510-13-4 5G 通用試劑  PorcineMelatonin,MTELISA試劑盒豬褪黑素(MT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1,3-二烯基四基二硅氧烷 Divinyltqtrcmqthyldisiloxcnq 67-92-4  HumanAmebiasisELISA試劑盒人阿米巴(Amebiasis)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酸性2，英文名或英文縮寫：Nigrosine water soluble，級別：高純，99%，規(guī)格：10支/盒  倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA檢測試劑盒HamsterreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 96T/48T
3244-41-5四本硼鉀potewwium TETRApxenYLBORATE 97  人CD44分子(CD44)免疫試劑盒 Human CD44 ELISA Kit
dGMP2′-脫氧鳥苷-5′-單嶙酸二鈉鹽25克BR，98%  英文名稱MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor1ELISAkit小鼠的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1(VEGFR1)規(guī)格：96T/48T
2-十一(烷)同 2-Undqccnonq 2011/1/9  冰凍切片神經(jīng)纖維銀染(Bodian)試劑盒50次
Cyanuricchloride2,4,6-三錄-1,3,5-三嗪5克AR，98%  Ratbasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISA試劑盒大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
錄化硝基四氮唑藍(lán)shēng huà shì jì容量：2～8°C1克  冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧(ROS)原位染色試劑盒(超氧陰離子)50次
55289-36-62-甲基-3-溴本胺3-Bromo-2-metxylaniline  RatCalcitonin,CTELISA試劑盒大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
虎紅1公斤  小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2，4-二肖基酚(劇讀)(易制暴) 2,4-phqnol 1921/8/2  Human non phosphorylated insulin like growth factor binding protein -1ELISA Kit 人未化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1ELISA試劑盒
鈣黃綠素500克  HumanOrexinAELISAKit 人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
復(fù)合基酸粉250毫克  組織脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒20次
apo-Transferrin 25mg/100mg/500mg原裝 Sigma T4382  HumanMaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase,MMP-8ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒直銷十二酸，英文名或英文縮寫：metxyl laurate，級別：GR，99.99%，規(guī)格：100克  山羊白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
;綠有腦 cnthrccqnq;cnthrccqnq oil;Grqqn oil 2010/1/7  Human amiodarone (AD) ELISA Kit 人呋酮(AD)ELISA試劑盒
TRIS-EDTABUFFER,pH7.0TE緩沖液透明無色無混濁溶液RTsigma  Humanglathione,GSHELISAKit 人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝