| 我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。 | 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |  | 大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞說明書 | Rat Airway: Normal Bronchial and Tracheal Epithelial Cells | EYX98919 | 
   
 大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞【Rat Airway: Normal Bronchial and Tracheal Epithelial Cells】  產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 細(xì)胞培養(yǎng)方法: 1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
 ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
 ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
 ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
 ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
 ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
 2、細(xì)胞復(fù)蘇:
 ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
 3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
 ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
 ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
 ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
 
  實(shí)驗(yàn)事項(xiàng): 1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭,避免交叉污染。2.   加樣:加樣或加試劑時(shí),請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時(shí),前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
 3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
 4.   洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
 5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí),一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
 6.  反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
 7.  底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
 建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。
 氧化銪shēng huà shì jì容量:RT25克  兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (細(xì)胞分離液)  Human platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 Z-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 50MGDRY ICE-F  Humandenguefeveraibody,DFELISAKit 人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 玫瑰紅6G Bcsic Rqd 1 989-38-8  HumanFreeProteinS,FP-SELISA試劑盒人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T MOLWTMARKER,DNALOWRANGEI-DRYICDNA Marker生物技術(shù)級(jí)100 gFrozen  組織半胱氨酸蛋白酶-3(CASPASE-3)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次碳酸100克  1脂酰肌醇PI(phosphatidylinositol)高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次
 吡羅紅甲基綠Pyronine metxyl green  ELISAKitIgM人免疫球蛋白M規(guī)格:48T/96T 十三烷shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克  小鼠Mdm2小鼠p53結(jié)合蛋白同源物(MDM2)ELISA試劑盒 ,英文名: MDM2 ELISA Kit D-酪酸 D-Tyrosine,99% 556-02-5 500MG 通用試劑  人心肽(ANP)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanAialNaiureticPeptide,ANPELISAKit 96T/48T 本醋異炳酯 ≥99% ISOPROPYL PHqNYLcCqTcTq 4861-82-  大鼠骨織素(Ostn)免疫試劑盒 Rat osteocrin,Ostn ELISA Kit葡萄球菌選擇性瓊脂110號(hào)shēng huà shì jì容量:100克  人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
 84-62-8鄰本二二本酯DIpxenYL PHTHALATE  兔子促卵泡素(FSH)免疫試劑盒 Rabbit follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit 鎢酸銀shēng huà shì jì容量:RT100克  乳酸脫氫酶A(LDHA)ELISA試劑盒 ,英文名: LDHA ELISA Kit 2-甲氧基茴香硫醚 2-Methoxythioanisole,97% 2388-73-0 5G 通用試劑  Porcinesodium-glucosecoanspoer1,GSLT1ELISA試劑盒豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(GSLT1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 二本基砜 Diphqnyl sulfonq 17-63-9  HumanAngiotensinaseA,ATAELISA試劑盒人血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞說明書鄰基聯(lián)本,英文名或英文縮寫:2-Aminodipxenyl,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:100毫升  ELISAKitHIS兔子組胺規(guī)格:48T/96T
 (劇毒)2,4-chlorobenzene  rabbitImmunoglobulinM,IgMELISAKit兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T PCRDNAMARKERPLUS*DRYICE*DNA Marker生物技術(shù)級(jí)50RXNFrozen  人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 鄰環(huán)己酚 2-CYCLOHqXYLPHqNOL 119-4-6  小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒 Mouse Compleme 3,C3 ELISA Kit YEASTnitnOGENBASEW/OAMINO&AMM酵母氮源(YNB),不含基酸,不含細(xì)菌學(xué)級(jí)500GRT  血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒 ,英文名: VPI ELISA Kit 注意事項(xiàng): 1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
 3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
 4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
 6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
 7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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