| 人脂肪來源的原代干細胞提取物【Human Adipose: Adipose Stem Cell Derivatives】 人脂肪來源的原代干細胞提取物是從人脂肪來源的原代干細胞提取的,人脂肪來源的原代干細胞從正常人人脂肪組織制備。正常人脂肪組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
 | 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |  | 人脂肪來源的原代干細胞提取物說明書 | Human Adipose: Adipose Stem Cell Derivatives | EYX99110 | 
   
 我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產品現(xiàn)貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。 細胞培養(yǎng)方法:1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
 ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
 ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
 ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
 ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
 ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
 2、細胞復蘇:
 ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
 3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
 ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
 ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
 ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
 
  實驗事項: 1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
 3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
 4.   洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
 5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
 6.  反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
 7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
 注意事項: 1. 接收到,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
 4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
 7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
 犬瘟熱病毒抗原(CDV)和犬腺病毒Ⅱ型抗原(CAV)檢測試紙條卡/包,包/盒Estradiol valerate9792戊酸雌二醇 犬細小病毒抗體(CPV)檢測試紙條卡/包,包/盒Estradiol hexahydrobenzoate1517環(huán)己甲酸雌二醇 犬瘟熱病毒抗體(CDV)檢測試紙條卡/包,包/盒Estradiol heptanoate49567庚酸雌二醇 犬細小病毒抗原(CPV)和犬抗原(CCV)檢測試紙條卡/包,包/盒Estradiol diproppionate1138二雌二醇 犬C反應蛋白檢測試紙條卡/包,包/盒Estra,9-diene,17-dione51736甲基雙烯雙酮Methyl 2-ethoxybenzimidazole-7-carboxylate  150058-27-8  中文名:  分子式:C11H12N2O3  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit
 Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate  98475-07-1  中文名:  分子式:Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒   Methyl 2,2-dithienylglycolate  26447-85-8  中文名:  分子式:C11H10O3S2  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒   Methyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  139481-28-0  中文名:  分子式:C22H17N3O4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠病毒(MVM)ELISA試劑盒   Methyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-2-ethoxy-1H-benzimidazole-7-carboxylate  139481-44-0  中文名:  分子式:C25H21N3O3  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA試劑盒鹽酸美西律(標準品)  Mexiletine Hydrochloride  質量規(guī)格:含量測定 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA檢測試劑盒RatBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISAKit 96T/48T
 美洛西林鈉  Mezlocillin   質量規(guī)格:>96%,CP,BR 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA檢測試劑盒RatBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISAKit 96T/48T 美洛西林鈉(標準品)  Mezlocillin   質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA檢測試劑盒RatBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit 96T/48T 米非司酮  Mifepristone  質量規(guī)格:>98.5%,BR 大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA檢測試劑盒RatBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISAKit 96T/48T 米非司酮(標準品)  Mifepristone  質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒RatBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 96T/48T 米氮平  Mirtazapine  質量規(guī)格:>99%,BR 大鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測試劑盒RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T 米氮平(標準品)  Mirtazapine  質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA檢測試劑盒RatCrosslaps,CrELISAKit 96T/48T 5-氟乳清酸;5-FOA  5-Fluoroorotic acid,5-FOA  質量規(guī)格:>99%,BR 大鼠骨橋素(OPN)ELISA檢測試劑盒RatOsteopoin,OPNELISAKit 96T/48T 枸櫞酸莫沙比利(標準品)  Mosapride   質量規(guī)格:≥98%,標準品用于含量測定 大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISA檢測試劑盒RatBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit 96T/48T 枸櫞酸莫沙比利  Mosapride   質量規(guī)格:≥98.5%,BR,二水合物 大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA檢測試劑盒Ratbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit 96T/48T人脂肪來源的原代干細胞提取物說明書β-N-乙酰基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒(比色法)  3-Allylrhodanine  1457-47-2  中文名:3-烯丙基羅丹寧  分子式:C6H7NOS2
 β-(D3-H)測定試劑盒(酶比色法)  4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  2549-87-3  中文名:4-丙烯氧基-2-羥基二苯甲酮  分子式:C16H14O3  α-銀環(huán)蛇(α-BGT)ELISAKit     Triptoquinone A  中文名:  分子式:C20H24O4  α-巖藻糖苷酶(AFU)測定試劑盒(速率法)                    Xanthopurpurin  518-83-2  中文名:1,3-二羥基蒽醌  分子式:C14H8O4  α戊二酸脫氫酶(α-KGDH)試劑盒   紫外分光光度法   50管/48樣              Atrazine  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5 |