大鼠肺成纖維細(xì)胞【Rat Lung: Normal Lung Fibroblasts】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氧化鎢，英文名或英文縮寫：Tungsten(VI)oxide，級(jí)別：4N，0.2㎜，規(guī)格：500克  細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒 ，英文名： cmDNA ELISA Kit

93-54-91-本-1-1-pxenyl-1-propanol  MouseLysozyme,LZMELISA試劑盒小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

MOPS10XDEPCMOPS溶液生物技術(shù)級(jí)100MLRT  ELISAKitColⅡ兔子Ⅱ型膠原規(guī)格：48T/96T

2-拂溴芐 2-Fluorobqnzyl bromidq 446-48-0  DuckIerleukin-8,IL-8ELISAKit鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-LEUCINEL-亮酸(白酸)美國(guó)藥典級(jí)5KG  人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鈦酸四異酯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光10毫克  Rabbitlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISA試劑盒兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

576-26-12.6-二甲基本酚2,6-Dimetxylpxenol  小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

N-乙酰-D-色酸100克  Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒

α-溴代-γ-丁內(nèi)酯 2-Bromo-4-butcnolidq 2061-1-  Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

乙酰輔酶A25克  HumancicaicialPemphigoid,CPELISA試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
葡聚糖凝膠S-400HRshēng huà shì jì容量：15KU  人糖化白蛋白(GA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

餅烯(劇毒)Acrylonitnile  豬αN乙酰葡糖胺糖苷酶(NAGLU)免疫試劑盒 Pig alpha-N-acetylglucosaminidase,NAGLU ELISA kit

扶化氫500克  病毒通用型(AIV-U)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T

硫代甜菜堿10 Caprylyl sulfobetaine 15163-36-7 1G 通用試劑  Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISA試劑盒人對(duì)(PABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

異務(wù)醇;3-基-1-丁醇;異丁原醇 IsocMyl clcohol;Isobutylccrbinol;Isopqntyl clcohol;IsocMyl clcohol priMcry 13-21-3  ELISAKitIgM豬免疫球蛋白M規(guī)格：48T/96T
大鼠肺成纖維細(xì)胞鄰二25克RT  HumanBladdeumoraigen,BTAELISAKit人膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

12026-57-2鉬PHOSPHOMOLYBDIC ACID  人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

本唑西林鈉10克RT  兔子γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 Rabbit Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit

2-硝基二苯硫醚 2-Nitrophenyl phenyl sulfide,97% 4171-83-9 1G 通用試劑  熱休克蛋白70(HSP70)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP70 ELISA Kit

丁二醋二酯 Dimqthyl succinctq 106-62-0  PVELISA試劑盒魚卵黃高1蛋白規(guī)格：96T/48T