成人皮膚成纖維細(xì)胞取物【Human Skin: Normal Dermal Fibroblasts Derivatives】

人皮膚成纖維細(xì)胞提取物是從人原代皮膚成纖維細(xì)胞提取的，人原代皮膚成纖維細(xì)胞從正常人皮膚成纖維組織制備。正常成人皮膚成纖維組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

犬細(xì)小病毒PCR檢測試劑盒/p-Anisil12262茴香偶酰

犬細(xì)小病毒通用型實時熒光PCR檢測試劑盒p-Anisic acid09對茴香酸

犬貓RT-PCR檢測試劑盒/Panaxyne1228559

犬貓實時熒光RT-PCR檢測試劑盒Panaxydiol6396

犬腺病毒PCR檢測試劑盒/Palmitone23棕櫚酮
Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate  中文名：  分子式：C22H19N3O2  度：98.0%  小鼠8異前列腺素elisa試劑盒   小鼠8異前列腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠8異前列腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠8異前列腺素試劑盒、小鼠8異前列腺素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-die7,16-d]oxazole-3,20-dione  中文名：  分子式：C23H29NO4  度：98.0%  小鼠8羥基脫氧鳥苷elisa試劑盒   小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒、小鼠8羥基脫氧鳥苷eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Deflazacort  中文名：地夫可特  分子式：C25H31NO6  度：98.0%  小鼠6前列腺素elisa試劑盒   小鼠6前列腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠6前列腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠6前列腺素試劑盒、小鼠6前列腺素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Cortisone acetate  中文名：醋酸可的松  分子式：C23H30O6  度：98.0%  小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥苷酸(mouse 8-OHdG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Hydroxyprogesterone  中文名：羥孕酮  分子式：C21H30O3  度：98.0%  小鼠食欲素A(mouse Orexin A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
鹽酸納曲酮  Naltrexone hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA檢測試劑盒Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit 96T/48T

三苯胂氧化物  Triphenylarsine oxide  質(zhì)量規(guī)格：BR 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA檢測試劑盒Humanai-fibrillarinaibody,AFA/snoRNP/U3RNPELISAKit 96T/48T

5,7,4'-三羥基-8-甲基二氫黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA檢測試劑盒Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 96T/48T

蘆薈苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)  Aloin B  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗肌動蛋白抗體(AAA)ELISA檢測試劑盒Humanai-Actinaibody,AAAELISAKit 96T/48T

牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA檢測試劑盒HumanCollagenaoaibody,CLAELISAKit 96T/48T

羅漢松樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA檢測試劑盒Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 96T/48T

石蕊  Litmus  質(zhì)量規(guī)格：AR 人抗菌肽(Attacin)ELISA檢測試劑盒HumanAttacinELISAKit 96T/48T

7-O-甲基蘆薈新甙A(標(biāo)準(zhǔn)品)  7-O-Methylaloeresin A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA檢測試劑盒Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit 96T/48T

肉蓯蓉苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cistanoside A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA檢測試劑盒HumanAi-Saccharomycescerevisiaeaibody,ASCAELISAKit 96T/48T

蘆薈新甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)  Aloeresin D  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA檢測試劑盒Humanaimousaibody,HAMAELISA 96T/48T
成人皮膚成纖維細(xì)胞取物價格α戊二酸脫氫酶（α-KGDH）測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣  Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名：苯甲酸利扎曲坦  分子式：C22H25N5O2  度：98.0%   

α-淀粉酶試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣  Trehalose  99-20-7  中文名：海藻糖  分子式：C12H22O11  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

α-淀粉酶測試盒   可見分光光度法   50管/24樣  Propranolol hydrochloride  318-98-9  中文名：鹽酸普萘洛爾  分子式：C16H22ClNO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

ypsinInhibitor,Soybean   1g                 Polyphyllin D  50773-41-6  中文名：重樓皂苷D  分子式：C44H70O16 

ypsin1:250,PorcinePancreas   25g  Polyphyllin D  中文名：重樓皂苷D  分子式：C44H70O16

 運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。