大鼠心肌成纖維細(xì)胞提取物【Rat Heart: Normal Heart Fibroblast Derivatives】

大鼠心肌成纖維細(xì)胞提取物是從大鼠心肌成纖維細(xì)胞提取的，大鼠心肌成纖維細(xì)胞從正常大鼠心肌組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

（NL63）單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Estradiol hexahydrobenzoate1517環(huán)己甲酸雌二醇

（229E）單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Estradiol heptanoate49567庚酸雌二醇

博卡病毒（HBocaV）單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Estradiol valerate9792戊酸雌二醇

偏肺病毒（HMPV）單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Cyproterone acetate4271醋酸環(huán)丙氯地孕酮

腺病毒（ADV）單重?zé)晒?/span>PCR檢測試劑盒48Megestrol acetate5953醋酸甲地孕酮
Human thrombin activatable fibrinolysis inhibitor / thrombin activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI)ELISA Kit 人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒  1-Actamido-3,5-dimethyladmantane  19982-07-1  中文名：  分子式：C14H23NO 

Human sP53 Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國 Diaclone     3-Methoxyfuran  中文名：  分子式：C5H6O2 

Human signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒  (S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  中文名：(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮  分子式：C10H11NO2 

Human signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒  (S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol  931114-98-6  中文名：  分子式：C10H10O2 

Human sex hormone binding globulin (SHBG) ELISA Kit 人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒  (S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  152305-23-2  中文名：(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2
銅標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,基體:1%HNO3)  Copper solution  質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體:1%HNO3 犬基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B)試劑盒 Dog maix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit

鈷標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)  Cobalt standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml 犬甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒 Canine Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit

六價鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml，溶劑：水)   Chromium Standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml，溶劑：水 犬甲狀腺素(T4)ELISA檢測試劑盒Caninethyroxine,T4ELISAKit 96T/48T

鉺標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)  Erbium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3 犬甲狀腺素(T4)試劑盒 Canine thyroxine,T4 ELISA Kit

金標(biāo)準(zhǔn)溶液(100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液)  Gold solution  質(zhì)量規(guī)格：100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液 犬堿性0酸酶(ALP)試劑盒 Canine alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit

銥標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基質(zhì)：2.0mol/L鹽酸)  Iridium standard solution  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基質(zhì)：2.0mol/L鹽酸 犬降鈣素(CALCA)試劑盒 Dog calcitonin,CALCA ELISA kit

鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑：1%硝酸)  Nickel standard  質(zhì)量規(guī)格：500mg/L,溶劑：1%硝酸 犬降鈣素原(PCT)試劑盒 Canine Procalcitonin,PCT ELISA Kit

鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(100µg/mL,基體:1%HCl)  Potassium standard  質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體:1%HCl 犬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)試劑盒 Dog Caveolin-1,CAV1 ELISA kit

鐠標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000µg/mL,基體：10%HCl)  Praseodymium standard  質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體：10%HCl 犬結(jié)蛋白(Des)試劑盒 Dog desmin,Des ELISA Kit

鎢標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體：0.1mol/LNaOH)  Tungsten solution  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體：0.1mol/LNaOH 犬結(jié)締組織生長因子(CTGF)試劑盒 Canine connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit
大鼠心肌成纖維細(xì)胞提取物價格人周期素依賴性激酶1elisa試劑盒   人周期素依賴性激酶1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人周期素依賴性激酶1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人周期素依賴性激酶1試劑盒、人周期素依賴性激酶1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     2-Hydroxyquinoxaline  中文名：  分子式：C8H6N2O 

人周期素依賴性激酶1(CDK1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human CDK1 (Cyclin Depende Kinase 1) ELISA Kit  2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  17241-40-6  中文名：  分子式：C15H10O3  度：%  關(guān)鍵詞：  白花蛇舌草; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISAKit     2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid  中文名：  分子式：C19H28INO3  度：98.0%

人重組激活基因2elisa試劑盒   人重組激活基因2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人重組激活基因2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人重組激活基因2試劑盒、人重組激活基因2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-Flurbiprofen  51543-40-9  中文名：氟比洛芬  分子式：C15H13FO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒              2-Hydroxy-3-methylanthraquinone  中文名：  分子式：C15H10O3