大鼠腦靜脈血管組織提取物【Brain: Normal Rat Cerebral Venous Vascular Derivatives】

腦組織是指包容在顱腔內(nèi)的三大塊神經(jīng)纖維組織：大腦、腦干和小腦。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠腦靜脈血管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

5(6)-FAM, SE0mg6-Amino-methyl-nitrosouracil69728

5-FAM, SE0mg2-Cyclopropyl-(4-fluorophenyl)quinoline-carboxaldehyde12167

6-FAM, SE0mgPitavastatin calcium1475262匹伐他汀鈣

6-HEX, SE5mgMethyl 3-cyclopropyl-oxopropionate322495

6-JOE, SE5mg3-Quinuclidinone373183-奎寧環(huán)酮
Capecitabine  154361-50-9  中文名：卡培他濱  分子式：C15H22FN3O6    Humancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISA試劑盒人胞漿球蛋白(CIg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-(N-Methyl)-aminoantipyrine  519-98-2  中文名：  分子式：C12H15N3O    組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定性檢測(cè)試劑盒20次

Valsartan methyl ester  137863-17-3  中文名：  分子式：C25H31N5O3    HumanplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

α-D-Glucose  492-62-6  中文名：α-D-葡萄糖  分子式：C6H12O6    胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine  35552-76-2  中文名：  分子式：C10H11N3    Rat angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 大鼠生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒
氯化矮牽牛素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化芍藥素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化芍藥素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化芍藥素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化錦葵色素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅢ,ColⅢELISAKit大鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化錦葵色素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅢ,ColⅢELISA試劑盒大鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化錦葵色素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg RatCollageypeⅣ,ColⅣELISAKit大鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

靈芝酸B HPLC≥98% 20mg RatCollageypeⅣ,ColⅣELISA試劑盒大鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

靈芝酸C HPLC≥95% 20mg RatCompleme3,C3ELISAKit大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

靈芝酸C HPLC≥95% 20mg RatCompleme3,C3ELISA試劑盒大鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠腦靜脈血管組織提取物線粒體檸檬酸(MCA）含量測(cè)試盒   紫外分光光度法   25管/24樣  Averantin  5803-62-3  中文名：  分子式：C20H20O7 

線粒體解偶聯(lián)蛋白2   英文名稱：   Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   UCP2  Fluoronaphthalene  321-38-0  中文名：  分子式：C10H7F  度：98.0%   

線粒體呼吸鏈復(fù)合物II試劑盒（琥珀酸-輔酶Q還原酶）  Avanafil  330784-47-9  中文名：阿伐那非  分子式：C23H26ClN7O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性測(cè)試盒   可見分光光度法   25管/24樣  Atrazine  中文名：阿特拉津  分子式：C8H14ClN5  度：98.0%

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ活性測(cè)試盒   可見分光光度法   25管/24樣              4,4'-Dimethoxytrityl chloride  中文名：4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷  分子式：C21H19ClO2

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。