| | 產(chǎn)品名稱 | 大鼠輸尿管上皮細胞提取物培養(yǎng) |  | 英文名稱 | Rat Ureter: Normal Ureter Derivatives |  | 貨號 | EYX99257 | 
 大鼠輸尿管上皮細胞提取物【Rat Ureter: Normal Ureter Derivatives】 大鼠輸尿管上皮細胞提取物是從大鼠原代輸尿管上皮細胞提取的,大鼠原代輸尿管上皮細胞從正常大鼠輸尿管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
 
    實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
 
    操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
 鵝源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒(不含提?。?/span>483-Allylrhodanine145773-烯丙基羅丹寧 兔源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒(不含提取)48Nandrolone laurate2641月桂酸諾龍 貂源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒(不含提取)48Androst-eneβ,17β-diol 3,17-diacetate996雄甾-烯β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 牛羊源性成分通用單重熒光PCR檢測試劑盒(不含提?。?/span>48Androstanolone heptanoate337768雄諾龍庚酸酯 狐貍源性成分單重熒光PCR檢測試劑盒(不含提?。?/span>4811α-Hydroxyandrost-ene,17-dione564311α-羥基-雄甾-烯,17-二酮Glycoursodeoxycholic acid  中文名:甘氨熊脫氧膽酸  分子式:C26H43NO5    豬骨鈣素elisa試劑盒   豬骨鈣素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豬骨鈣素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬骨鈣素試劑盒、豬骨鈣素eisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個月。
 Glycodeoxycholic acid  中文名:甘氨脫氧膽酸  分子式:C26H43NO5    豬睪elisa試劑盒   豬睪試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豬睪試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬睪試劑盒、豬睪eisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個月。   Glyceryl hexacosanoate  中文名:  分子式:C29H58O4    豬基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit    Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  中文名:  分子式:C29H58O5    豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISAKit    Glycerol  中文名:甘油  分子式:C3H8O3    豬睪(T)ELISAKit酸棗仁皂苷B1(標準品)  Jujuboside B1  質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA檢測試劑盒Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKIT 96T/48T
 薯蕷皂苷A  Prosapogenin A  質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)試劑盒 Rat free chorionic gonadoopin,f-βCG ELISA KIT Rocilinostat (ACY-1215)  ACY1215  質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性組蛋白脫乙酰酶(HDAC6)抑制劑 大鼠游離雌三醇(FE3)試劑盒 Rat free Esiol,FE3 ELISA Kit 肉豆蔻酸,十四烷酸(標準品)  Myristic acid  質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,標準品 大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 96T/48T 肉豆蔻酸,十四烷酸  Myristic acid  質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 大鼠游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 Rat Free Testosterone,F-TESTO ELISA Kit 丁二酮肟(鎳試劑)  Dimethylglyoxime  質(zhì)量規(guī)格:AR 大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA檢測試劑盒RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit 96T/48T 黃酮  Flavone  質(zhì)量規(guī)格:>98%,進分 大鼠游離甲狀腺素(FT4)試劑盒 Rat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit 依維菌素  Ivermectin  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA檢測試劑盒RatFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit 96T/48T 細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)  CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester  質(zhì)量規(guī)格:≥90%,用于熒光標記 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)試劑盒 Rat Free Prostate Specific Aigen,fPSA ELISA Kit CAPE (咖啡酸苯乙酯)  CAPE (Caffeic Acid Phenethylester)  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠游離肉堿試劑盒 Rat Free Carnitine ELISA Kit大鼠輸尿管上皮細胞提取物培養(yǎng)乳酸脫氫酶(LDH)測試盒   Lactate dehydrogenase (LDH) test kit  3-Acetylcoumarin  中文名:3-乙?;愣顾?/span>  分子式:C11H8O3  度:99.0%
 乳酸(LD)測試盒(測血清、組織等)   Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名:  分子式:C8H8O4   乳酸(LD)測試盒(測全血)   Lactic acid (LD) test case (whole blood)  3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名:  分子式:C8H8O4  度:%  關鍵詞:  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 乳酸(LD)(血清、組織)檢測   Lactic acid (LD) (whole blood) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名:3-乙酰基香豆素  分子式:C11H8O3  度:99.0%  關鍵詞:  乳酸(LD)(全血)檢測   Lactate dehydrogenase (LDH) detection  3-Acetylcoumarin  3949-36-8  中文名:3-乙?;愣顾?/span>  分子式:C11H8O3 運輸和保存:視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
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