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小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物

小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物
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產(chǎn)品特點(diǎn):
小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
  小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物的詳細(xì)資料:

小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物【Mouse Kidney: Normal Renal Tubular Derivatives

小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代腎小管上皮細(xì)胞提取的,小鼠原代腎小管上皮細(xì)胞從正常小鼠腎小管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 

產(chǎn)品名稱

小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物

英文名稱

Mouse Kidney: Normal Renal Tubular Derivatives

貨號(hào)

EYX99135

 

 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存:

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

 

操作要點(diǎn):

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

牛支原體抗體 ELISA檢測(cè)試劑盒1922-Amino-N-(2-chloro-methylphenyl) thiazole-carboxamide29644

感抗體ELISA檢測(cè)試劑盒96Dabigatran etexilate2119156

新城疫抗體ELISA檢測(cè)試劑盒96Ethyl 3-(3-amino-(methylamino)-N-(pyridin-yl)benzamido)propanoate2123226

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羊口蹄疫亞I型抗體ELISA檢測(cè)試劑盒192Methyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-yl)methyl]-ethoxyH-benzimidazole-carboxylate1394814
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Macranthoin G  159934-13-1  中文名:灰氈毛忍冬素分子式:C26H26O12  度:97.0%  關(guān)鍵詞:  抗氧化; 灰氈毛忍冬; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠尿微量白蛋白   英文名稱:   Mouse Microalbunminuria   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   MAU

Lynestrenol  52-76-6  中文名:利奈孕醇  分子式:C20H28O  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠黏膜選擇素黏附分子1   英文名稱:   Mouse Mucosal Vascular Addressin Cell Adhesion Molecule 1   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   MADCAM-1

Lurasidone  367514-87-2  中文名:魯拉西酮  分子式:C28H36N4O2S  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA試劑盒  

Loxoprofen  68767-14-6  中文名:洛索洛芬  分子式:C15H18O3  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠鐵調(diào)素(Hepcidin)ELISA試劑盒
鹽酸艾司洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)  Esmolol HCl  質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)試劑盒 Human CTX-2 ELISA Kit

鹽酸艾司洛爾  Esmolol HCl  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人骨涎蛋白(BSP)試劑盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit

H-Met-OtBu.HCL  H-Met-OtBu·HCl  質(zhì)量規(guī)格:0.98 人骨形成蛋白4(BMP4)試劑盒 Human BMP4 ELISA Kit

麥芽糖醇  Maltitol   質(zhì)量規(guī)格:>98% 人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 Human BMP-6 ELISA Kit

L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽  L-Threonine methyl ester hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格:0.98 人骨織素(Ostn)試劑盒 Human osteocrin,Ostn ELISA kit

N-乙酰-L-色氨酸乙酯  Ac-Trp-Oet  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,BR 人瓜氨酸試劑盒 Human Ciulline ELISA Kit

N-乙酰-DL-色氨酸  N-Acetyl-DL-tryptophan  質(zhì)量規(guī)格:0.98 人胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)試劑盒 Human AGMAT ELISA Kit

N-甲酰-DL-色氨酸  Nalpha-Formyl-DL-tryptophan  質(zhì)量規(guī)格:0.98 人寡聚蛋白(oligomeric)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanoligomericproteinELISAKit 96T/48T

L-酪氨酸叔丁酯  L-Tyrosine tert-butyl ester   質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人胱硫醚β-合酶(CBS)試劑盒 Human cystathionine β-syhase,CBS ELISA Kit

O-芐基-L-酪氨酸  O-Benzyl-L-tyrosine  質(zhì)量規(guī)格:0.98 人胱天蛋白酶1(Casp-1)試劑盒 Human Caspase 1,Casp-1 ELISA Kit
小鼠腎小管上皮細(xì)胞提取物凋亡相關(guān)因子   英文名稱:   apoptosis-inducing factor Fas   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   Fas  Cleroindicin C  183626-28-0  中文名:  分子式:C8H12O3 

淀粉酶 b 1-42(Amyloid b 1-42)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   德國(guó) IBL     Methylprednisolone  83-43-2  中文名:甲基潑尼松龍  分子式:C22H30O5 

淀粉含量測(cè)試盒   可見分光光度法   50/48  Propranolol hydrochloride  中文名:鹽酸普萘洛爾  分子式:C16H22ClNO2 

氮快速測(cè)試盒    niogen rapid test case                 Physapruin A  155178-03-3  中文名:  分子式:C28H38O7 

氮快速測(cè)定試劑盒    niogen rapid determination kit  Physapruin A  中文名:  分子式:C28H38O7

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小鼠腎小管上皮 細(xì)胞提取物
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