產(chǎn)品名稱 | 小鼠腎小管平滑肌細胞提取物說明書 | 英文名稱 | Mouse Tubular:Normal TubularDerivatives | 貨號 | EYX99138 |
小鼠腎小管平滑肌細胞提取物【Mouse Tubular:Normal TubularDerivatives】 小鼠腎小管平滑肌細胞提取物是從小鼠原代腎小管平滑肌細胞提取的,小鼠原代腎小管平滑肌細胞從正常小鼠腎小管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
 操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 牛奶中金黃色葡萄球菌核酸檢測試劑盒(無需過夜培養(yǎng))24T/48TNebivolol hydrochloride16929鹽酸奈必洛爾 牛奶中沙門氏菌核酸檢測試劑盒(無需過夜培養(yǎng))24T/48TN-Demethylricinine216428 霍亂弧菌恒溫核酸檢測試劑盒24T/48Tn-Butyl-β-D-fructopyranoside678847 單核細胞增生李斯特菌恒溫核酸檢測試劑盒24T/48Tn-Butyl β-D-fructofuranoside971-正丁基-β-D-呋喃果糖苷 大腸埃希氏菌O157:H7恒溫核酸檢測試劑盒24T/48TN-Boc-O-Benzyl-D-serine4717N-Boc-O-芐基-D-絲氨酸 Loxoprofen 中文名:洛索洛芬 分子式:C15H18O3 豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISAKit Losartan 中文名:氯沙坦 分子式:C22H23ClN6O 豬可溶性內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAKit Loroglossin 中文名: 分子式:C34H46O18 豬雌激素(E)ELISA試劑盒 Loratadine 中文名:氯雷他定 分子式:C22H23ClN2O2 豬雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒 Loperamide hydrochloride 中文名:鹽酸洛哌丁胺 分子式:C29H34Cl2N2O2 豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒 鹽酸阿米替林 HPLC≥98% 100mg MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISA試劑盒小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去甲替林鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISA試劑盒小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 苯佐卡因 HPLC≥99% 100mg MouseSomatostatin,SSELISA試劑盒小鼠生長抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 飛燕草色素 HPLC≥98% 10mg MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISA試劑盒小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 矮牽牛色素 HPLC≥98% 5mg MouseSubstanceP,SPELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 芍藥素 HPLC≥98% 10mg MousesubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 錦葵色素 HPLC≥98% 10mg MouseSuperOxidaseDimase,SODELISA試劑盒小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 環(huán)腺苷 HPLC≥98% 20mg Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISA試劑盒小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 安息香 HPLC≥99% 100mg MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISA試劑盒小鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T D綿子糖 HPLC≥98% 20mg MouseTestoterone,TELISA試劑盒小鼠睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠腎小管平滑肌細胞提取物說明書多酚氧化酶(PPO)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Pirfenidone 53179-13-8 中文名:哌非尼酮 分子式:C12H11NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 多巴胺 英文名稱: Human Dopamine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: DPN 3β-Hydroxyergost-5-en-7-one 中文名: 分子式:C28H46O2 度:% 動植物組織葡萄糖含量試劑盒 酶標法 50管/48樣 4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one hydrochloride 中文名: 分子式:C14H18ClN3O4 度:98.0% 動植物組織葡萄糖含量試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one hydrochloride 中文名: 分子式:C14H18ClN3O4 動物組織基因組提取試劑盒 Animal tissue genomic Exaction Kit Periplocoside F 119902-17-9 中文名: 分子式:C63H104O23 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 |