小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物【Mouse Coronary Artery:NormalCoronary Artery Derivatives】 小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物是從小鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取的,小鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞從正常小鼠動脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng) | 英文名稱 | Mouse Coronary Artery:NormalCoronary Artery Derivatives | 貨號 | EYX99145 |

實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
 操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。 內(nèi)酰胺酶 ELISA試劑盒96TN-Acetoacetylmorpholine166954N-乙酰嗎啉 利巴韋林 ELISA試劑盒96TN-Methyl,7-dioxo-sulfamoyl,6-dihydroH-thieno[2,3-b]thiopyran-yl]acetamide143 沙拉沙星 ELISA試劑盒96TN6-Benzyladenine12149N6-芐基腺嘌呤 雙氟沙星 ELISA試劑盒96TN6-Benzoyladenine059N6-苯甲酰基腺嘌呤 桿菌肽 ELISA試劑盒96TN6-Benzoyl'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)'-deoxyadenosine643258N6-苯甲?;?/span>'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)'-脫氧腺苷 L-Isoleucine 50g Vildagliptin 274901-16-5 中文名:維達列汀 分子式:C17H25N3O2 Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5 Vildagliptin 中文名:維達列汀 分子式:C17H25N3O2 Lectin,fromiticumvulgaris Trenbolone heptanoate N 中文名: 分子式:C25H34O3 Lectin,fromArachisHypogaea(pean) Trenbolone heptanoate 中文名: 分子式:C25H34O3 Kisser封片液 10ml Anthraquinone 中文名:蒽醌 分子式:C14H8O2 度:98.0% 亞油酸膽酯(>95.0%(T)) Cholesterol Linoleate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 小鼠再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)ELISA試劑盒 ,英文名: REG3α ELISA Kit 棕櫚酸膽酯(>97.0%(T)) Cholesterol Palmitate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) 小鼠再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA試劑盒 ,英文名: REG3γ ELISA Kit 正辛酸膽酯(>95.0%(GC)) Cholesterol n-Octanoate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠早期生長應答因子1(EGR1)ELISA試劑盒 ,英文名: EGR1 ELISA Kit 油酸膽酯(>85.0%(GC)) Cholesterol Oleate 質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(GC) 小鼠早期生長應答因子2(EGR2)ELISA試劑盒 ,英文名: EGR2 ELISA Kit 氯化膽(來自牛脂)(>87.0%(GC)) Cholesteryl Chloride from Beef Fat 質(zhì)量規(guī)格:>87.0%(GC) 小鼠早期生長應答因子4(EGR4)ELISA試劑盒 ,英文名: EGR4 ELISA Kit 反-肉桂酸膽酯(>96.0%(HPLC)(T)) Cholesterol trans-Cinnamate 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(HPLC)(T) 小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC1 ELISA Kit 癸酸膽酯 Cholesterol Decanoate 質(zhì)量規(guī)格: 小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC2 ELISA Kit 氫化肉桂酸膽酯(>95.0%(GC)) Cholesterol Hydrocinnamate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA檢測試劑盒MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 96T/48T 膽酯(>95.0%(GC)) Cholesterol Laurate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC5AC ELISA Kit 豆蔻酸膽酯(>98.0%(T)) Cholesterol Myristate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC5B ELISA Kit 小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)干細胞因子受體 (SCF R) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Paris Saponin VII 68124-04-9 中文名:重樓皂苷VII 分子式:C51H82O21 干細胞因子受體 英文名稱: stem cell factor receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SCF R Parecoxib 198470-85-8 中文名:帕瑞考昔鈉 分子式:C19H17N2NaO4S 干細胞因子 (SCF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Paris Saponin VII 68124-04-9 中文名:重樓皂苷VII 分子式:C51H82O21 度:98.0% 關鍵詞: 干細胞因子 英文名稱: stem cell factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SCF Parecoxib 198470-85-8 中文名:帕瑞考昔鈉 分子式:C19H17N2NaO4S 度:98.0% 關鍵詞: 干擾素α受體 英文名稱: Human Ierferon α Receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IFNαR Pramipexole dihydrochloride 104632-25-9 中文名:鹽酸普拉克索 分子式:C10H19Cl2N3S |