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小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)

小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)
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小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
  小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)的詳細資料:

小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物【Mouse Coronary ArteryNormalCoronary Artery Derivatives

小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物是從小鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取的,小鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細胞從正常小鼠動脈組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 

產(chǎn)品名稱

小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)

英文名稱

Mouse Coronary ArteryNormalCoronary Artery Derivatives

貨號

EYX99145

 

 

 實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存:

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

 

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

內(nèi)酰胺酶 ELISA試劑盒96TN-Acetoacetylmorpholine166954N-乙酰嗎啉

利巴韋林 ELISA試劑盒96TN-Methyl,7-dioxo-sulfamoyl,6-dihydroH-thieno[2,3-b]thiopyran-yl]acetamide143

沙拉沙星 ELISA試劑盒96TN6-Benzyladenine12149N6-芐基腺嘌呤

雙氟沙星 ELISA試劑盒96TN6-Benzoyladenine059N6-苯甲酰基腺嘌呤

桿菌肽 ELISA試劑盒96TN6-Benzoyl'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)'-deoxyadenosine643258N6-苯甲?;?/span>'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)'-脫氧腺苷
L-Isoleucine   50g                 Vildagliptin  274901-16-5  中文名:維達列汀  分子式:C17H25N3O2 

Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5  Vildagliptin  中文名:維達列汀  分子式:C17H25N3O2 

Lectin,fromiticumvulgaris                    Trenbolone heptanoate  N  中文名:  分子式:C25H34O3 

Lectin,fromArachisHypogaea(pean)  Trenbolone heptanoate  中文名:  分子式:C25H34O3 

Kisser封片液   10ml  Anthraquinone  中文名:蒽醌  分子式:C14H8O2  度:98.0%
亞油酸膽酯(>95.0%(T))  Cholesterol Linoleate  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 小鼠再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)ELISA試劑盒 ,英文名: REG3α ELISA Kit

棕櫚酸膽酯(>97.0%(T))  Cholesterol Palmitate  質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) 小鼠再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA試劑盒 ,英文名: REG3γ ELISA Kit

正辛酸膽酯(>95.0%(GC))  Cholesterol n-Octanoate  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠早期生長應答因子1(EGR1)ELISA試劑盒 ,英文名: EGR1 ELISA Kit

油酸膽酯(>85.0%(GC))  Cholesterol Oleate  質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(GC) 小鼠早期生長應答因子2(EGR2)ELISA試劑盒 ,英文名: EGR2 ELISA Kit

氯化膽(來自牛脂)(>87.0%(GC))  Cholesteryl Chloride from Beef Fat  質(zhì)量規(guī)格:>87.0%(GC) 小鼠早期生長應答因子4(EGR4)ELISA試劑盒 ,英文名: EGR4 ELISA Kit

-肉桂酸膽酯(>96.0%(HPLC)(T))  Cholesterol trans-Cinnamate  質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(HPLC)(T) 小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC1 ELISA Kit

癸酸膽酯  Cholesterol Decanoate  質(zhì)量規(guī)格: 小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC2 ELISA Kit

氫化肉桂酸膽酯(>95.0%(GC))  Cholesterol Hydrocinnamate  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA檢測試劑盒MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 96T/48T

膽酯(>95.0%(GC))  Cholesterol Laurate  質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC5AC ELISA Kit

豆蔻酸膽酯(>98.0%(T))  Cholesterol Myristate  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC5B ELISA Kit
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細胞提取物培養(yǎng)干細胞因子受體 (SCF R)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝     Paris Saponin VII  68124-04-9  中文名:重樓皂苷VII  分子式:C51H82O21 

干細胞因子受體   英文名稱:   stem cell factor receptor   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   SCF R  Parecoxib   198470-85-8  中文名:帕瑞考昔鈉  分子式:C19H17N2NaO4S 

干細胞因子 (SCF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Paris Saponin VII  68124-04-9  中文名:重樓皂苷VII  分子式:C51H82O21  度:98.0%  關鍵詞: 

干細胞因子   英文名稱:   stem cell factor   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   SCF  Parecoxib   198470-85-8  中文名:帕瑞考昔鈉  分子式:C19H17N2NaO4S  度:98.0%  關鍵詞: 

干擾素α受體   英文名稱:   Human Ierferon α Receptor   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   IFNαR  Pramipexole dihydrochloride  104632-25-9  中文名:鹽酸普拉克索  分子式:C10H19Cl2N3S

產(chǎn)品相關關鍵字: 小鼠冠狀動脈內(nèi)皮 細胞提取物
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