人體卵巢癌組織提取物【Cancer: Human Ovarian Cancer Derivatives】

卵巢癌是女性器官常見(jiàn)的腫瘤之一，發(fā)病率僅次于子和子宮體癌而列居第三位。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍人體卵巢癌組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

MOPS   25g/g/0g(R)-Methoxydalbergione46466(R)-甲氧基黃檀醌

MOPSO   25g(R)-Benzyl-oxazolidinone294(R)-芐基-惡唑烷酮

MS干粉培養(yǎng)基不含維生素 Duchefa   L (R)-(+)-Amino-methyl,1-diphenyl-butanol866956(R)-(+)-氨基-甲基,1-二苯基-丁醇

MS干粉培養(yǎng)基含維生素 Duchefa   L (R)-(+),1'-Bi-naphthol185314(R)-(+),1'-聯(lián)-萘酚

MTT 噻唑蘭   2mg/ 1g(R)-(-)-Benzyl-propionyl-oxazolidinone1316853(R)-(-)-芐基-丙?；?/span>-惡唑烷酮
Dihydrosenkyunolide C  195142-72-4  中文名：二氫洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H14O3    兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Glyceryl hexacosanoate  127098-14-0  中文名：  分子式：C29H58O4    Rat heme oxygenase 2 (HO-2) ELISA Kit 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒

Digalactosyldiacylglycerol  145033-48-3  中文名：雙半乳糖二酰甘油  分子式：C49H88O15    HumanProinsulin,PIELISAKit 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  122475-42-7  中文名：  分子式：C18H24N4O18    HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA試劑盒人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Senkyunolide G  94530-85-5  中文名：洋川芎內(nèi)酯G  分子式：C12H16O3    組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
羥基豨薟精醇 HPLC≥98% 5mg Rat soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒

氧代beta谷甾醇 HPLC≥98% 5mg Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒

氧代扁柏脂素 HPLC≥98% 5mg Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒

乙酸,二羥基雙氫黃酮酯 HPLC≥98% 5mg Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒

異戊烯氧基gamma花椒堿 HPLC≥98% 5mg Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒

(),異海松二烯,二醇 HPLC≥98% 5mg Rat tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒

羥基蓽澄茄烯酮 HPLC≥98% 5mg Rat telomerase (TE) ELISA Kit 大鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒

Alfa鐵杉脂素 HPLC≥98% 5mg Rat terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒

Alpha菠菜甾酮 HPLC≥98% 5mg Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒

alpha乳香酸 HPLC≥98% 5mg Rat thioredoxin (x) ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒
人體卵巢癌組織提取物培養(yǎng)高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 

兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒、兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  7-Amino-4-methylcoumarin  26093-31-2  中文名：7-氨基-4-甲基香豆素  分子式：C10H9NO2  度：98.0%   

兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒、兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  22252-43-3  中文名：  分子式：C8H10N2O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒     7-Acetoxy-4-methylcoumarin  2747/5/9  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4  度：95.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISAKit                 7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one  中文名：  分子式：C10H10ClNO

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。