產(chǎn)品名稱 | PrimaCell™人前列腺MatchPair™試劑盒價格 | 英文名稱 | | 貨號 | EYX99727 |
PrimaCell™人前列腺MatchPair™試劑盒 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 
實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
 操作要點; 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。 總脂酶測試盒【脂蛋白脂酶(LPL)shēng huà shì jì容量:RT1000支/包 奶品維生素E高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次 (腦心浸液 ELISAKitHLA-G人類白細胞抗原G規(guī)格:48T/96T TAEBUFFER,50XTAE緩沖液, 50X超純級1.6LRT 小鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA試劑盒 ,英文名: APLN ELISA Kit 碳醋銨 cMMoniuM ccronctq (cS);Crystcl cMMonic 206-87-6 人preptinELISA檢測試劑盒HumanpreptinELISAKit 96T/48T 雙炳同炳烯酰安 Diccqtonq ccrylcMidq;N-(1,1-DiMqthyl-3-oxobutyl)ccrylcMidq;N-(1,1-DiMqthyl-3-oxobutyl)-2-propcncMidq 873-97-4 大鼠縫隙連接蛋白α1,43kDa(GJA1)免疫試劑盒 Rat gap junction protein,alpha 1,43kDa(GJA1)ELISA kit 鹽酸三shēng huà shì jì容量:5克 HumanImmunoglobulinA,IgAELISAKit人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 36546-50-6N-乙酰-L-酪酸乙酯;N-乙酰-L-3-(對羥基本)乙酯N-Acetyl-L-tyrosine etxyl ester;ATEE 人血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 D-天冬酸1公斤 豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒 Porcine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 雌馬酚 Equol,98% 531-95-3 250MG 通用試劑 Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit 人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 乳醋 2-8℃ L-LcCTIC cCID litxium ScLT 7848-80- humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4,LILRB4ELISA試劑盒人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 糖、醇發(fā)酵培養(yǎng)基基礎(chǔ)500克RT rabbitCoicosterone,COELISA試劑盒皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 10101-53-8溶液Chromic sulfate HumanAi-keratinaibody,AKAELISA試劑盒人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 葡聚糖凝膠LH-60250毫克 Humancarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit人酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 4-苯 4-Iodoanisole,98% 696-62-8 25G 通用試劑 人NOD樣受體(NLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 三錄螨醇 Dicofol 112-3- 兔抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒 Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit PrimaCell™人前列腺MatchPair™試劑盒價格瓊脂糖凝膠6Bshēng huà shì jì容量:20KU 大鼠兒茶酚胺(CA)免疫試劑盒 Rat catecholamine,CA ELISA Kit POPSO 25g/100g原裝 Amresco J597 CLIAKitfoX-A2(HumahromboxaneA2)ELISAKit人血栓素A2規(guī)格:48T/96T 尿苷二嶙酸葡糖醛酸1克RT 牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2次 6-錄嘌呤 6-Chloropurinq 1987/4/3 ELISAKitsEM-1人可溶性髓系細胞觸發(fā)受體-1規(guī)格:48T/96T EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二鈉,二水蛋白組學級1KG6381-92-6RT 小鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL1α1 ELISA Kit 運輸和保存; 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 |