小鼠肺大動(dòng)脈組織提取物【Mouse Lung: Normal Artery Derivatives】

肺大動(dòng)脈管壁分為內(nèi)膜、中膜和外膜，各層結(jié)構(gòu)隨動(dòng)脈分支而變化，以中膜變化大，其管壁含大量彈性膜和彈性纖維。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍小鼠肺大動(dòng)脈組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

IPTG   1g/5g/g/g1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-O-trans-p-coumaroylsucrose1381959

Janus Green B 詹納斯綠B   1g/1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-O-trans-p-coumaroylsucrose1382133

Kanamycin sulfate卡那霉素硫酸鹽   5g /25g 1,5-Pentanediol diacrylate3685

KT/激動(dòng)素   1g/5g 1,5,15-Tri-O-methylmorindol94295

L-ArabinoseL-阿拉伯糖   g/25g 1,4-Bis[2-(4-methyl-phenyloxazolyl)]benzene7371,4-二[2-(4-甲基-苯基惡唑基)]苯
Desloratadine  100643-71-8  中文名：脫羧氯雷他定  分子式：C19H19ClN2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠前心肽elisa試劑盒   小鼠前心肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠前心肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠前心肽試劑盒、小鼠前心肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Desglucohellebrin  20300-44-1  中文名：  分子式：C30H42O10  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心; 強(qiáng)心苷; 甾苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒  

Deoxyneocryptotanshinone  27468-20-8  中文名：  分子式：C19H22O3  度：97.5%  關(guān)鍵詞：    小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒  

Deoxylapachol  3568-90-9  中文名：  分子式：C15H14O2  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  細(xì)胞毒活性; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒  

Deoxycholic acid  83-44-3  中文名：去氧膽酸  分子式：C24H40O4  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  膽烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒
強(qiáng)力霉素鹽酸鹽  Doxycycline hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatAquaporin5ELISAKit大鼠水通道蛋白5(AQP5)規(guī)格：96T/48T

強(qiáng)力霉素磺基水楊酸  Doxycycline ssa  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatargininevasopressinELISAKIT大鼠精氨酸加壓素規(guī)格：96T/48T

強(qiáng)力霉素?？怂猁}  Doxycycline Hyclate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatATHELISAKit大鼠促腎上腺激素皮質(zhì)激素(RatATH)規(guī)格：96T/48T

帕米二鈉鹽  Pamidronate, Di Salt  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatATHELISAKit大鼠促腎上腺激素皮質(zhì)激素(RatATH)規(guī)格：96T/48T

頭孢呋辛  Cefuroxime  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatAT-IIIELISAKit大鼠抗凝血酶(AT-III)規(guī)格：96T/48T

頭孢他啶-d5  Ceftazidime-d5  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatAT-IIIELISAKit大鼠抗凝血酶(AT-III)規(guī)格：96T/48T

Δ2-頭孢他啶  Δ2-Ceftazidime  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatAZTELISAKit大鼠疊氮胸苷(AZT)規(guī)格：96T/48T

頭孢他啶五水化合物  Ceftazidime Pentahydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatAZTELISAKit大鼠疊氮胸苷(AZT)規(guī)格：96T/48T

頭孢唑啉  Cefazolin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatB1-ARELISAKit大鼠心肌細(xì)胞膜B1-AR規(guī)格：96T/48T

17β-羧酸氟替卡松  Fluticasone 17β-Carboxylic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatBigETELISAKit大鼠大內(nèi)皮素(BigET)規(guī)格：96T/48T
小鼠肺大動(dòng)脈組織提取物兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (Z)-Lachnophyllum lactone  81122-95-4  中文名：  分子式：C10H10O2  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒     8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  1265908-20-0  中文名：  分子式：C28H40O3 

兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISAKit                 8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2 

兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2  度：98.0%

兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒   兔子可溶性CD40配體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子可溶性CD40配體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal  中文名：  分子式：C35H52O5

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。