大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物【Rat Brain: Normal Olfactory Bulb Ensheathing Cells Derivatives】

大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物是從大鼠原代嗅鞘細(xì)胞提取的，大鼠原代嗅鞘細(xì)胞從正常大鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

大腸桿菌BL211mlAllopurinol31別嘌醇

巴斯德畢赤酵母X331mlAllitol4884蒜糖醇

畢赤酵母GS1151mlAlbendazole549651阿苯達(dá)唑

畢赤酵母SMD11681mlAgomelatine1381126阿戈美拉汀

枯草芽孢桿菌WB01mlAflatoxin B111625黃曲霉毒素B1
Formestane  中文名：福美司坦  分子式：C19H26O3  度：98.0%  小鼠IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

4-Chlorotestosterone acetate  中文名：醋酸氯睪酮  分子式：C21H29ClO3  度：98.0%  小鼠IgM(mouse IgM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Estra-4,9-diene-3,17-dione  中文名：甲基雙烯雙酮  分子式：C18H22O2  度：98.0%  小鼠白介素-1a(mouse IL-1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Methoxydienone  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2  度：98.0%  小鼠白介素-1b(mouse IL-1b)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Methasterone  中文名：甲基屈他雄酮  分子式：C21H34O2  度：98.0%  小鼠IgE   英文名稱：    immunoglobulin E   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgE
司班80;司盤80  Span* 80  質(zhì)量規(guī)格：BR 等電聚焦蛋白電泳(IEF)2倍上樣緩沖液10毫升

聚乙二醇1000  PEG 1000  質(zhì)量規(guī)格：分子量1000 等電聚焦蛋白電泳(IEF)標(biāo)準(zhǔn)補(bǔ)水緩沖液50毫升

胰蛋白胨(BD)  Tryptone  質(zhì)量規(guī)格：BD 211705 等電聚焦蛋白電泳(IEF)強(qiáng)化補(bǔ)水緩沖液50毫升

丹磺酰氯  DNSCl, Dansyl chloride  質(zhì)量規(guī)格：>98% 等位基因特異性表達(dá)分析試劑盒5

N-乙基順丁烯二  N-Ethylmaleimide  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 等位基因特異性表達(dá)分析試劑盒5

碳酸氫鉀(AR)  Potassium bicarbonate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR 低分子蛋白標(biāo)準(zhǔn)樣100

十二烷基磺酸鈉(BR)   dodecanesulfonate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 低內(nèi)小量質(zhì)粒抽提試劑盒20/50

茶堿  Theophylline  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 低鹽LB細(xì)菌培養(yǎng)液500毫升

纖維素酶  Cellulase  質(zhì)量規(guī)格：>2000U/mg 地塞米松細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測(cè)試劑盒20

硫酸軟骨素  Chondroitin sulfate  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 地生蘭(terresial)播種培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物價(jià)格十六烷基-二甲基-乙基-溴化銨   50g  3-O-Methyl-3-methoxymaxterone  92282-70-7  中文名：3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇  分子式：C21H36O3  度：98.0%   

生長(zhǎng)因子   英文名稱：   Human Growth Factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GF  3-O-Benzyl estrone  858-98-0  中文名：3-O-芐基雌酚酮  分子式：C25H28O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

生長(zhǎng)相關(guān)因子 α(GRO α)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Pentoxyverine   23142-01-0  中文名：枸櫞酸噴托維林  分子式：C26H39NO10  度：98.0%   

生長(zhǎng)相關(guān)因子 (GRO)    作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Pentoxyverine   中文名：枸櫞酸噴托維林  分子式：C26H39NO10 

生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因a   英文名稱：   growth-regulated oncogene a   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GRO a  3-O-Acetylandrostenone hydrazone  122914-94-7  中文名：3-O-乙?；弁?/span>  分子式：C21H32N2O2  度：98.0%