小鼠淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物【Mouse Lymph: Normal Lymphatic Blood Vessel Endothelial Cells Derivatives】

小鼠淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物是從小鼠原代淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞提取的，小鼠原代淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞從正常小鼠淋巴組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

麻痹性貝類毒素(PSP)ELISA試劑盒96TLoratadine797945氯雷他定

腹瀉性貝類毒素(DSP)ELISA試劑盒96TLoperamide hydrochloride345523鹽酸洛哌丁胺

健忘性貝類毒素(ASP)ELISA試劑盒96TLonidamine2649氯尼達(dá)明

流行性出血熱病毒 EHDV—抗體檢測(cè) ELISA試劑盒96TLomefloxacin hydrochloride9792鹽酸洛美沙星

羥基丁酸 ELISA試劑盒96TLithocholic acid4343石膽酸
Lansoprazole  中文名：蘭索拉唑  分子式：C16H14F3N3O2S    豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit              

Lamivudine  中文名：拉米夫定  分子式：3O3S    豬氧化酶(DAO)ELISAKit  

Lafutidine  中文名：拉呋替丁  分子式：C22H29N3O4S    豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISAKit  

Labetalol hydrochloride  中文名：鹽酸拉貝洛爾  分子式：C19H25ClN2O3    豬腸三葉因子(ITF)ELISAKit  

L-(+)-Arginine  中文名：L-(+)-精氨酸  分子式：C6H14N4O2    豬活化素A(ACV-A)ELISAKit
化鉀(光譜SP)  Potassium bromide  質(zhì)量規(guī)格：光譜SP 犬孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T

偶氮胂Ⅰ水合物(90%)  Arsenazo I Hydrate  質(zhì)量規(guī)格：0.9 犬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/DLA)ELISA檢測(cè)試劑盒Caninemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/DLAELISAKit 96T/48T

無(wú)水硫酸鈉(SP)   sulfate anhydrous  質(zhì)量規(guī)格：SP 犬轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA檢測(cè)試劑盒Canineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T

二甲基砜(核磁共振定量標(biāo)準(zhǔn)品)  Dimethyl sulfone  質(zhì)量規(guī)格：核磁共振定量標(biāo)準(zhǔn)品 犬組胺(HIS)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineHistamine,HISELISAKit 96T/48T

1,3-(標(biāo)準(zhǔn)品)  1,3-Propanediol  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeyHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 96T/48T

順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  DHA  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人(MGO)試劑盒 Human Methylglyoxal,MGO ELISA KIT

二甲硝咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)  Dimetridazole  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit 96T/48T

青霉素V鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Penicillin V potassium salt  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人0酯酶C(PLC)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPhospholipaseC,PLCELISAKit 96T/48T

2-NP-AOZ(標(biāo)準(zhǔn)品)  2-NP-AOZ  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit 96T/48T

磺胺醋酰(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sulfacetamide  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit 96T/48T
小鼠淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 (AIL/APO 2L )   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Arctinol B  102054-39-7  中文名：  分子式：C13H12O2S2 

壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體   英文名稱：   tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   AIL/APO 2L  Perforatumone  827319-50-6  中文名：  分子式：C35H52O5  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

壞死因子β   英文名稱：   Rat Tumor Necrosis Factor β   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TNF  β  Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  中文名：雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯  分子式：C23H34O4 

壞死因子α受體   英文名稱：   Human Tumor Necrosis Factor α Receptor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TNFαR  Ritonavir  155213-67-5  中文名：利托那韋  分子式：C37H48N6O5S2 

化十六烷基   100g  3-O-Benzyl estrone  中文名：3-O-芐基雌酚酮  分子式：C25H28O2  度：98.0%