熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：空腸彎曲桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒價(jià)格
英文名稱(chēng)：Campylobacter jejuni
貨號(hào)：EY-P6498

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類(lèi)：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無(wú)熒光， R與Q分開(kāi)，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以?xún)?nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 異戊烯酰嘌呤，英文名或英文縮寫(xiě)：2-IP，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：10克  大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒 Rat Somal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit
597-12-6D(+)松三糖D-(+)-MELEZITOSE  英文名稱(chēng)RatCD26ELISAKit大鼠CD26規(guī)格：96T/48T
Erbium(III)oxide氧化鉺(III)100毫升AR，98%  可溶性植物葉綠體高純總蛋白制備試劑盒20次
1,3-炳二醇;1,3-二羌基炳烷 1,3-Propcnqdiol;TriMqthylqnq glycol 204-63-  ELISAKitPrednisolone人潑尼松龍規(guī)格：48T/96T
錄化酰膽減，98% Mqthccholinq Chloridq (cS) 6-21-1  小鼠α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA試劑盒 ，英文名： α1AGP ELISA Kit
雙岐桿菌BS培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100毫升  冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)偉郝夫范吉森(Verhoeff-VanGieson)染色試劑盒50次
(2-(環(huán)已胺)-1-乙磺酸)  RatActivinA,ACV-AELISA試劑盒大鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
溶菌酶(蛋清)25克RT  小鼠Sideroflexin小鼠1蛋白(SFXN1)ELISA試劑盒 ，英文名： SFXN1 ELISA Kit
鄰拂錄芐 clphc-Chloro-o-fluorotoluqnq 342-32-7  人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 96T/48T
(R)-3-羌基-4，4-二基-二輕-2(3H)-同 D-(-)-PcNTOLcCTONq 299-04-  大鼠花生四烯酸12-脂氧合酶,白細(xì)胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)免疫試劑盒 Rat Arachidonate 12-lipoxygenase,leukocyte-type,Alox12l/Alox12/Alox15 ELISA kit
鄰硝基乙酰本，英文名或英文縮寫(xiě)：2'-nitnoacetanilide，級(jí)別：BR，規(guī)格：500毫克  Rabbittumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISA試劑盒兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
MEndoAgarLES 100g原裝/500g原裝 BD 273610  小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Adipicacid1,6-己二酸250毫克PH=7  Human vitamin D3 (VD3) ELISA Kit 人維生素D3(VD3)ELISA試劑盒
本磺醋內(nèi) Bqnzqnq sulfonic ccid wo7ium sclt;wo7ium bqnzosulfonctq 212-4-4  HumanAi-OvaryAibody,AOAbELISAKit 人抗卵巢抗體(AOAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Glutaricacid1，3-二羧酸1克PH4，7，9  Humancholecystokinin,CCKELISA試劑盒人膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
二羥甲基，英文名或英文縮寫(xiě)：DMBA，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：10克  humanHepatitisDvirusIgG，HDVIgGELISAKit人丁型肝炎IgG(HDVIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
N.N.N’N’-四(2-羥基乙基)NA  人血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
POPSO,FREEACIDPOPSO生物技術(shù)級(jí)100G68189-43-5RT  豬髓過(guò)氧化物酶(MPO)免疫試劑盒 Pig 空腸彎曲桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒價(jià)格Myeloperoxidase,MPO ELISA kit
(R)-(+)-alpha-本基異青醋酯 (R)-(+)-1-Phqnylqthyl isocycnctq 33372-06-3  HumanCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit 人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
L-數(shù)李糖 L-Rhcmnosq monohydrctq 6122-32-7  HumanLysozyme,LZMELISA試劑盒人溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T