大鼠表皮黑色素細(xì)胞提取物【Rat Skin: Normal MelanocytesDerivatives】 大鼠表皮黑色素細(xì)胞提取物是從大鼠原代表皮黑色素細(xì)胞提取的,大鼠原代表皮黑色素細(xì)胞從正常大鼠皮膚組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 大鼠表皮黑色素細(xì)胞提取物說明書 | 英文名稱 | Rat Skin: Normal MelanocytesDerivatives | 貨號 | EYX99282 |

實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
 操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。 超低分子量蛋白Marker III(3.0kd) 次 5-BenzylH-tetrazole1848955-芐基H-四唑 超低分子量蛋白Marker IV(3.35kD) 次 5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate135743N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-芐酯 低分子量蛋白Marker II(14.416KD) 次 5-Benzyl L-glutamate16763L-谷氨酸5-芐酯 低分子量蛋白質(zhì)Marker I (14.47.4kD) 次 5-Benzyl D-glutamate25783D-谷氨酸5-苯甲酯 高分子量蛋白Marker(KD) 次 5-Benzoylpentanoic acid414425-苯甲酰基戊酸 Flumethasone 2135-17-3 中文名:氟米松 分子式:C22H28F2O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠β甘露糖苷酶elisa試劑盒 小鼠β甘露糖苷酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠β甘露糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠β甘露糖苷酶試劑盒、小鼠β甘露糖苷酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Flumequine 42835-68-7 中文名:氟甲喹鈉 分子式:C14H11FNNaO3 度:98.0% 小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒 Flumequine 42835-25-6 中文名:氟甲喹 分子式:C14H12FNO3 度:98.0% 小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒 Fludarabine 21679-14-1 中文名:氟達(dá)拉賓 分子式:C10H12FN5O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒 Floribundone 1 118555-84-3 中文名: 分子式:C32H22O10 度:99.0% 關(guān)鍵詞: 光葉決明; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒 水飛薊素 Silymarin 質(zhì)量規(guī)格:水飛薊素UV 80%;雙賓30% 小鼠催乳素釋放激素(PRH)ELISA試劑盒 ,英文名: PRH ELISA Kit 鐵蛋白 Ferritin 質(zhì)量規(guī)格:BR,20%水溶液 小鼠催乳素抑制激素(PIH)ELISA試劑盒 ,英文名: PIH ELISA Kit 鵝去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Chenodeoxycholic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠存活素(Surv)ELISA試劑盒 ,英文名: Surv ELISA Kit 鵝去氧膽酸 Chenodeoxycholic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)ELISA試劑盒 ,英文名: Acta2/Actsa/Actvs ELISA Kit 胰島素(牛) INSULIN 質(zhì)量規(guī)格:BR,27U/mg,進(jìn)分 小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 胰島素(牛) INSULIN 質(zhì)量規(guī)格:BR,27U/mg,進(jìn)分 小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒 ,英文名: Big ET ELISA Kit L-天門冬氨酸鉀 L-Aspartate Potassium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP1)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP1 ELISA Kit 輔酶Q10,泛醌 Coenzyme Q10,Ubiquinone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP-1 ELISA Kit 輔酶Q10(標(biāo)準(zhǔn)品) Coenzyme Q10 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 維生素A醋酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品) vitamin A acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA檢測試劑盒Mousemonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 96T/48T 大鼠表皮黑色素細(xì)胞提取物說明書四甲基化銨 100g 4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 1533-45-5 中文名:4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式:C28H18N2O2 度:98.0% 水質(zhì)檢測儀、比色計試劑 Water quality detector, colorimeic reage 4-(Phenylthio)benzyl alcohol 6317-56-2 中文名: 分子式:C13H12OS 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 水質(zhì)讀卡儀器 Water quality reading card insume 4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 519-98-2 中文名: 分子式:C12H15N3O 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 水硬度快速測試盒 Water hardness rapid test case α-Spinasterol glucoside 1745-36-4 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 抗真菌; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 水樣中六價鉻離子(Cr6+)濃度測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl 147118-37-4 中文名: 分子式:C16H18FN3O3S |