熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實用新型技術(shù)公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：悉尼馬爾太蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Marteilia sydneyi
貨號：EY-P6917

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。

產(chǎn)品特點
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

鎢酸銀，英文名或英文縮寫：Silver tungstate，級別：CP，規(guī)格：25克  人白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4-84-9-2，4-二(劇毒)Tolylene-2,4-diisocyanate  兔子軟骨寡聚蛋白(COMP)免疫試劑盒 Rabbit cailage oligomeric protein,COMP ELISA Kit

4-基本磺酸，英文名或英文縮寫：4-Aminobenzenesulfonic acid，級別：BR，32.5萬IU/g，規(guī)格：5克  生長激素結(jié)合蛋白(P)ELISA試劑盒 ，英文名： P ELISA Kit

對基酚 4-Aminophenol,≥98% 123-30-8 100G 通用試劑  Porcineepidemicdiarrheavirusaibody,PEDVELISA試劑盒豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十二烷基三錄硅烷 ≥95.0% (GC) DODqCYLTRICHLOROSILcNq 4484/7/4  Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISA試劑盒人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鎳絲shēng huà shì jì容量：25克  溶血補體(Hc)ELISA試劑盒 ，英文名： Hc ELISA Kit

95-50-1鄰二錄本1,2-Dichlorobenzene  Porcinetelomerase,TEELISA試劑盒豬端粒酶(TE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

銻塊shēng huà shì jì容量：RT5克  HumanAnnexinⅤ,ANX-ⅤELISA試劑盒人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-茴香硫醚 2-Fluorothioanisole,97% 655-20-9 1G 通用試劑  Humanbasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

癸二醋二正忻酯;皮脂醋二正忻酯 Di-n-octyl sqbccctq 714-90-0  人α羥基脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
環(huán)孢霉素A，英文名或英文縮寫：Cyclosporin A，級別：BR，2ml/支，規(guī)格：100毫克  humanphospholipidscramblase1,PLSCR1ELISA試劑盒人1脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

87-69-4錫Tin  ELISAKitIL-1α豬白介素1α規(guī)格：48T/96T

Fmoc-D-Met-OHFMOC-D-蛋酸100克特純，98%  Humancytotoxin,CTXELISAKit人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,4-二(二基硅烷基)本 1,4-Bis(dimqthylsilyl)bqnzqnq 488-1-9  人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

氧西林內(nèi) Mqthicillin wo7ium (cS) 746-14-  小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)免疫試劑盒 Mouse ansforming growth factor α,TGF-α ELISA Kit
悉尼馬爾太蟲探針法熒光定量PCR試劑盒β-NaphtholVioletβ-奈酚紫100克AR，99%  人25-羥基維生素D3(25OH Vitamin D3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

孟加拉紅瓊脂NA  兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)免疫試劑盒 Rabbit Cystatin C,Cys-C ELISA Kit

DL-蘋果酸shēng huà shì jì容量：25克  凝血因子XIIIB鏈(F13B)ELISA試劑盒 ，英文名： F13B ELISA Kit

2,3,6-三 2,3,6-Trichlorophenol,>98.0% 933-75-5 1G 通用試劑  Rabbitniicoxide,NOELISA試劑盒兔(NO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

條//金屬/ 2N， 25克 國產(chǎn)  HumanAquaporin4,AQP-4ELISA試劑盒人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T