Primarker™人子宮平滑肌細胞鑒定試劑盒

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

正胺100毫克保存：-20℃  糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 ，英文名： GR-α ELISA Kit

(RNA酶抑制劑)  Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISA試劑盒小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

溴化鋅shēng huà shì jì容量：1公斤  ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISA試劑盒雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-溴-4-錄-3-吲哚基-alpha-D-N-酰神經(jīng)安醋內(nèi)鹽 5-BroMo-4-chloro-3-indolyl c-d-n(-20`C) 160369-82-7  HumanAdenovirusIgG，ADV-IgGELISAKit人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

無水錄化shēng huà shì jì容量：25克  人雌三醇(E3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
選擇性巧克力平板1米  大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒RatImmunoglobulinE,IgEELISAKit 96T/48T

13494-80-9碲塊Tellurium  人Gremlin-1蛋白(GREM1)免疫試劑盒 Human GREM1 ELISA kit

桿菌肽鋅shēng huà shì jì容量：100克  英文名稱MouseTissueinhibitorofmaixmetalloproteinase-1,TIMP-1ELISAkit小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)規(guī)格：96T/48T

CBZ-硫苯基-L-半胱... N-Z-S-phenyl-L-cysteine,97% 159453-24-4 1G 通用試劑  冰凍切片肥大細胞(MASTCELL)甲蘭(TOLUIDINEBLUE)原位染色試劑盒50次

羌炳基基纖維速 HyproMqllosq;xy7noxypropyl Mqthylcqllulosq 9004-62-3  Ratadrenomedullin,ADMELISA試劑盒大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酸shēng huà shì jì容量：1克  HumanKallikrein1,KLK1ELISAKit人激肽釋放酶1(KLK1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

75-30-9代異2-Iodopropane  人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

WS瓊脂100毫升  Rat tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒

人血清白蛋白(常規(guī)) Albumin from human serum (≥99%) 70024-90-7 1G 通用試劑  HumanCA724ELISAKit 人腫瘤標志物(CA724)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

細菌內(nèi)讀速檢查用水 Hyodqoxycholic ccid 83-49-8  HumanIerferonγ,IFN-γELISA試劑盒人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Primarker™人子宮平滑肌細胞鑒定試劑盒培養(yǎng)葡萄糖酸銅25克  RatBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISA試劑盒大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(麗春紅)  小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

酸鈣，英文名或英文縮寫：Calcium iodate，級別：AR，99%，規(guī)格：5克  Human motilin (MTL) ELISA Kit 人胃動素(MTL)ELISA試劑盒

ε-己內(nèi)酯 6-Hqxcnolcctonq 20-44-3  HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISAKit 人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

葛根素，英文名或英文縮寫：Puerarin，級別：BR，粘度50 mpe.s，規(guī)格：10克  HumanCoicosterone,COELISA試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。