我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,雜交瘤細胞;GC-5D1培養(yǎng)貨期短,價格優(yōu),售后齊全。點擊進入了解更多小鼠源細胞。 產(chǎn)品描述: 細胞名稱 雜交瘤細胞;GC-5D1培養(yǎng) 形態(tài)特性淋巴母細胞樣 生長特性半貼壁生長 特征特性該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)10%FBS 傳代方法1:3傳代,3-4天傳1次 傳代情況C5 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性 STR 同工酶 染色體
 冷凍保存細胞之方法: 雜交瘤細胞;GC-5D1培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 細胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備: 1)雜交瘤細胞;GC-5D1培養(yǎng)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。 二.細胞處理: 1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 氯多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)2508g用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)(SN02)。 M63 Broth 培養(yǎng)基 250g incubation media M63 Broth 培養(yǎng)基 250g 乙型副傷寒沙門氏菌 模式菌株,奧薩霉素 支/瓶 Lecithinpolysorbate(LP)diluent MiddleBrook7H10瓊脂 250g 用于分枝桿菌的分離培養(yǎng) 雜交瘤細胞;GC-5D1培養(yǎng)*Ntn1(HumanNetrin-1)ELISAKit人軸突生長誘向因子1規(guī)格:48T *REG-4(HumanregeneratinggeneIV)ELISAKit人再生基因蛋白IV規(guī)格:48T *VS(Humanversican/PG-M/PG-350)ELISAkit人多功能蛋白聚糖規(guī)格:48T *Nfkbie(HumannuclearfactorofkappalightpolypeptidegeneenhancerinB-cellsinhibitorepsilon)KLISAKit人B細胞κ輕肽基因增強子核因子抑制因子ε規(guī)格:48T *ADAMTS4(HumanADAMmetallopeptidasewiththrombospondintype1motif4)ELISAKit人ADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1基元4規(guī)格:48T *HumansimilartoRIKENcDNA4933429F08geneELISAKit人類似RIKENcDNA4933429F08基因規(guī)格:48T *PAQR7(HumanprogestinandadipoQreceptorfamilymemberVII)ELISAKit人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ規(guī)格:48T *COLEC11(Humancollectinsub-familymember11)ELISAKit人集蛋白亞家族成員11規(guī)格:48T *Serpina3g(Humanserine/cysteinepeptidaseinhibitorcladeAmember3G)ELISAKit人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進化枝3G規(guī)格:48T *HumansimilartoRIKENcDNAA630077B13geneELISAKit人類似RIKENcDNAA630077B13基因規(guī)格:48T 注意事項: ?1.一般客戶拿到雜交瘤細胞;GC-5D1培養(yǎng)后,應該注意什么? 客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。 收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。 細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 |