人輸尿管上皮細(xì)胞提取物【Human Ureteral: Normal Ureteral Epithelial Cell Derivatives】

人輸尿管上皮細(xì)胞提取物是從人輸尿管上皮細(xì)胞提取的，人輸尿管上皮細(xì)胞從正常人輸尿管組織制備。正常人輸尿管組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

鴨細(xì)小病毒核酸快速診斷試劑盒 LAMP-PCR法TEpigoitrin723表告依春

鴨細(xì)小病毒核酸快速診斷試劑盒 PCR法TEpiandrosterone4819表雄酮

Nunc 免疫管（Immuno Tube）0根/包Enrofloxacin936-恩諾沙星

貂源性成分快速鑒別試劑盒 實(shí)時熒光PCR法測/盒Enalapril maleate7956馬來酸依那普利

狐貍源性成分快速鑒別試劑盒 實(shí)時熒光PCR法測/盒Emtricitabine1434917恩曲他濱
Norethindrone  68-22-4  中文名：炔諾酮  分子式：C20H26O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗利尿激素/加壓素(mouse AVP/ADH)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Norandrostenedione  734-32-7  中文名：19-去甲-4-雄烯二酮  分子式：C18H24O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠固(mouse ALD)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

n-Octylbenzene  2189-60-8  中文名：  分子式：C14H22  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒  

Nitrendipine  39562-70-4  中文名：尼群地平  分子式：C18H20N2O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠腺病毒（ADV）ELISA試劑盒  

Nifuroxazide  965-52-6  中文名：硝呋酚  分子式：C12H9N3O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠纖維蛋白肽B（FPB）ELISA試劑盒
銀杏內(nèi)酯C(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ginkgolide C  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 ，英文名： ADAM8 ELISA Kit

銀杏內(nèi)酯J(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ginkgolide J  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 ，英文名： ADAM9 ELISA Kit

隱丹參酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cryptotanshinone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA檢測試劑盒MouseADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 96T/48T

隱丹參酮  Cryptotanshinone  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，BR 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 ，英文名： ADAM8 ELISA Kit

?；蛆Z去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Taurochenodeoxycholic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒 ，英文名： ADAM9 ELISA Kit

隱綠原酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cryptochlorogenic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠金屬硫蛋白1(MT1)ELISA試劑盒 ，英文名： MT1 ELISA Kit

鷹嘴豆芽素A(標(biāo)準(zhǔn)品)  Biochanin A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠金屬硫蛋白1(MT-1)ELISA試劑盒 ，英文名： MT-1 ELISA Kit

鷹嘴豆芽素A  Biochanin A  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA試劑盒 ，英文名： MT-2 ELISA Kit

柚皮苷,川陳皮素  Naringin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠晶狀體蛋白αB(CRYαB)ELISA試劑盒 ，英文名： CRYαB ELISA Kit

羽扇豆醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  Lupeol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠精胺氧化酶(SMOX)ELISA試劑盒 ，英文名： SMOX ELISA Kit
人輸尿管上皮細(xì)胞提取物說明書Tenacigenin B  中文名：  分子式：C21H32O5  度：%  兔內(nèi)啡肽-b(rabbit Endorphin-b)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Uzarigenin  中文名：  分子式：C23H34O4  度：97.5%  兔雌二醇(rabbi E2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Odoroside H  中文名：  分子式：C30H46O8  度：98.5%  兔上腺素(rabbit EPI)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Neridienone B  中文名：  分子式：C21H28O4  度：95.0%  兔內(nèi)皮型合成酶elisa試劑盒   兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔內(nèi)皮型合成酶試劑盒、兔內(nèi)皮型合成酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Neritaloside  中文名：  分子式：C32H48O10  度：97.5%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶1elisa試劑盒   兔基質(zhì)金屬蛋白酶1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔基質(zhì)金屬蛋白酶1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔基質(zhì)金屬蛋白酶1試劑盒、兔基質(zhì)金屬蛋白酶1elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

 運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。