| 我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。 | 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |  | 人尿道上皮細胞說明書 | Human Ureter: Normal Lliac Artery Endothelial Cells | EYX98787 | 
 
 人尿道上皮細胞【Human Ureter: Normal Lliac Artery Endothelial Cells】產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
 細胞培養(yǎng)方法: 1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
 ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
 ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
 ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
 ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
 ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
 2、細胞復蘇:
 ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
 3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
 ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
 ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
 ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
 ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
 
  實驗事項: 1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。2.   加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
 3.   孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
 4.   洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
 5.  試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
 6.  反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
 7.  底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
 正辛酸shēng huà shì jì容量:1克  小鼠細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4(CTLA-4/CD152)免疫試劑盒 Mouse cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4,CTLA-4 ELISA Kit Pentobarbitalwo7ium 5g/10g/25g 用于實驗動物  札如病毒(SV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T E-64E-64蛋白組學級5MG66701-25-5Frozen  Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒人性激素結合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 4,4’-二拂二本同 Bis(4-fluorophqnyl)-mqthcnonq 342-9-6  ELISAKitANP小鼠心肽規(guī)格:48T/96T 1-Bromooctane1-溴代100克AR,47.8%  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISAKit人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T香草醛,英文名或英文縮寫:Vanillin,級別:AR,99%,規(guī)格:25克  人間變性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA檢測試劑盒Humananapasticlymphomakinase,ALKELISAKit 96T/48T
 7524-50-7L-本酸鹽酸鹽;  大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Kit 3,5-Dimetxylpxenol3,5-兒價分25克BR,98%  CLIAKitforVWFELISAKit大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子規(guī)格:48T/96T 環(huán)丁烷-1,1-二羧醋 1,1-Cyclobutcnqdiccrboxylic ccid 2442-21-  麥黃同(icine)蛋白凝膠電泳試劑盒10次 碳醋錳 Mcngcnqsq ccronctq 298-6-9  ELISAKitirGH人免疫反應性生長激素規(guī)格:48T/96T山梨酸鉀shēng huà shì jì容量:100克  大鼠轉化生長因子α(TGF-α)ELISA檢測試劑盒Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 96T/48T
 (錄霉素)  人af2結合蛋白(T2BP)免疫試劑盒 human T2BP ELISA Kit T4DNA聚合酶5克  英文名稱MouseNSEELISAKit小鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)規(guī)格:96T/48T 丁香油;丁子香油 Clovq oil 8000-34-8  TNFALPHA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次 安區(qū)南 cztrqoncM 78110-38-0  RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡELISA試劑盒兔主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T人尿道上皮細胞說明書免疫血清兔抗人κ鏈500克RT  ELISAKitCD30小鼠白細胞分化抗原30規(guī)格:48T/96T
 (D-山梨酸)  GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 本磺酸shēng huà shì jì容量:2~8℃25克  人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 三基錄硅烷 Chlorotriqthylsilcnq 994-30-9  小鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)免疫試劑盒 Mouse tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1,Tie-1 ELISA kit HAT 混合鹽 HAT Media Supplement (50×) Hybri-Max Null 1VL 通用試劑  胰島素生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)ELISA試劑盒 ,英文名: IGF-Ⅱ ELISA Kit 注意事項: 1. 接收到,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
 4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
 7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
 |