| 小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞提取物【Mouse Brain: Normal Nerve AstrocytesDerivatives】 小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞提取物是從小鼠原代神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞提取的,小鼠原代神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
 | 產(chǎn)品名稱 | 小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞提取物說明書 |  | 英文名稱 | Mouse Brain: Normal Nerve AstrocytesDerivatives |  | 貨號 | EYX99190 | 
   
    實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
  運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
 1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
 
    操作要點: 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
 5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
 巨細胞病毒核酸定量檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tegafur1723替加氟 輪狀病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tebipenem pivoxil1617154泰比培南酯 腸道腺病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Tazobactam acid897864他唑巴坦酸 甲型流感病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)24人份/盒Taxoquinone217641 核酸提取試劑(全血)人份/盒、0人份/盒、48人份/盒、96人份/盒Taxilluside A16619146Humanpituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  19-Nortestosterone acetate  中文名:19-去甲睪酮乙酸鹽  分子式:C20H28O3
 Humanpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  18-Hydroxytritriacontan-16-one  97191-42-9  中文名:  分子式:C33H66O2   HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  中文名:17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式:C26H30O3   HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名:  分子式:C36H56O13   HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人0酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  17α-Estradiol  中文名:17α-雌二醇  分子式:C18H24O2物質(zhì)P(1-9)  Substance P (1-9)  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細胞周期素D3(CCND3)ELISA試劑盒 ,英文名: CCND3 ELISA Kit
 物質(zhì)P(7-11)  Substance P (7-11)  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒 ,英文名: Cyclin-D3 ELISA Kit TA-0910,他替瑞林  TA-0910, taltirelin  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠夏科雷登氏結(jié)晶蛋白(CLC)ELISA試劑盒 ,英文名: CLC ELISA Kit 促甲狀腺激素釋放激素,游離酸  TRH, Free Acid  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 尿皮質(zhì)激素Ⅲ,小鼠  Urocortin III, mouse  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA檢測試劑盒MouseFibronectin,FNELISAKit 96T/48T 纈絡(luò)肽(VQY),豬  Valosin Peptide (VQY),porcine  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 ,英文名: FN ELISA Kit 血管活性腸肽  Vasoactive Intestinal peptide  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Z-Ala-Ala-Leu-pNA  Z-Ala-Ala-Leu-pNA  質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測試劑盒Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit 96T/48T 三亞甲基碳酸酯  TMC   質(zhì)量規(guī)格: 度≥99% 小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 ,英文名: PAP ELISA Kit 碳酸錳(>98%,BR)  Manganese (II) carbonate  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI-1 ELISA Kit小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞提取物說明書其它醌類              People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒E
 3,4-Didehydrosapriparaquione  142763-37-9  中文名:  分子式:C20H24O3    Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Royleanone  6812-87-9  中文名:  分子式:C20H28O3    Humandynorphin,DynELISA試劑盒人強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Salvisyrianone  250691-57-7  中文名:  分子式:C20H24O3    組織P38a激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 Dihydroisotanshinone I  20958-18-3  中文名:  分子式:C18H14O3    Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T |