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人體角膜成纖維細胞提取物

人體角膜成纖維細胞提取物
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產品特點:
人體角膜成纖維細胞提取物在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
  人體角膜成纖維細胞提取物的詳細資料:

產品名稱

人體角膜成纖維細胞提取物

英文名稱

Human Eye: Normal Corneal Cells Derivatives

貨號

EYX99075

人體角膜成纖維細胞提取物【Human Eye: Normal Corneal Cells Derivatives

人角膜成纖維細胞分離自正常人角膜結締組織,主要功能:(1)成纖維細胞是結締組織中見的一種細胞。(2)可在角膜創(chuàng)傷后修復組織。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

 實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點:

1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

鼠源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/Dronedarone hydrochloride1416253鹽酸決奈達隆

魚源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/Dromostanolone propionate5212屈他雄酮酯

牦牛源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/Drevogenin A1633

海貍鼠源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/Dregeoside Ga1986656

兔源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/Dregeoside Da1986655
N-Acetyl-5-hydroxytryptamine  中文名:N-乙?;?/span>-5-羥基色胺  分子式:C12H14N2O2  度:99.0%  小鼠αN已?;咸擒彰?/span>elisa試劑盒   小鼠αN已?;咸擒彰冈噭┖?/span>   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠αN已酰基葡糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αN已?;咸擒彰冈噭┖?、小鼠αN已酰基葡糖苷酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone  中文名:2-氨基-2',5-二氯二苯酮  分子式:C13H9Cl2NO  度:99.0%  小鼠αL巖藻糖苷酶elisa試劑盒   小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒、小鼠αL巖藻糖苷酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

3-Allylrhodanine  中文名:3-烯丙基羅丹寧  分子式:C6H7NOS2  度:99.0%  小鼠αL艾杜糖苷酸酶elisa試劑盒   小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  

Nandrolone laurate  中文名:月桂酸諾龍  分子式:C30H48O3  度:98.0%  小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA試劑盒  

Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate  中文名:雄甾-5--3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯  分子式:C23H34O4  度:98.0%  小鼠αN已?;咸擒彰?/span>(αNAG)ELISA試劑盒
乙基betaD吡喃葡萄糖苷 HPLC98% 5mg RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA試劑盒大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙酸()桂酯 HPLC98% 5mg RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAKit大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙酸Delta香樹精酯 HPLC98% 5mg RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA試劑盒大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙酸茶酸酯 HPLC98% 5mg RaeninELISAKit大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙酸東莨菪素酯 HPLC98% 5mg RaeninELISA試劑盒大鼠腎素(Renin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙酸二聚松柏酯 HPLC98% 5mg raesistinELISAKit大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙酸六棱菊亭酯 HPLC98% 5mg raesistinELISA試劑盒大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙酸維生素E HPLC98% 20mg Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠視黃醇結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙酰胺 HPLC98% 5mg Raetinol-bindingprotein,RBPELISA試劑盒大鼠視黃醇結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

乙?;惏叵┧?/span> HPLC98% 5mg Raetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit大鼠視黃醇結合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人體角膜成纖維細胞提取物Trazodone hydrochloride  中文名:鹽酸曲唑酮  分子式:C19H23Cl2N5O    GuanidineHydrochloride   500g              

trans-4-Aminocyclohexanol  中文名:  分子式:C6H13NO    月桂?;溠刻擒?/span>   1g

Tranexamic acid  中文名:凝血酸  分子式:C8H15NO2    N-Dodecyl-β-Maltoside

Torososide A  中文名:  分子式:C38H32O15    新霉素   5g

Topiramate  中文名:托吡酯  分子式:C12H21NO8S    NeomycinSulfate   25g

運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

 

產品相關關鍵字: 人體角膜成纖維 細胞提取物
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