| 我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T培養(yǎng)貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多轉(zhuǎn)化細(xì)胞。產(chǎn)品描述:
 細(xì)胞名稱 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T培養(yǎng)
 形態(tài)特性上皮樣
 生長特性貼壁生長 特征特性表達(dá)SV40大T抗原,可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細(xì)胞;用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染時(shí)可高表達(dá)AP融合蛋白。 培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:4~8傳代;26~36小時(shí)1次 傳代情況C5 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測(cè)培養(yǎng)法(-) STRAmelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:9,14;D18S51:17,18;D19S433:17,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:5,16,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,13,14;FGA:21,22,23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19,20; 同工酶 染色體62~69
  冷凍保存細(xì)胞之方法:
 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
 細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
 1)SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
 二.細(xì)胞處理:
 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 Hb-AGE*人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格48T/96T
 HB-β*人血紅蛋白β亞基規(guī)格48T/96T HbH*人血紅蛋白H規(guī)格48T/96T HbC*人血紅蛋白C規(guī)格48T/96T angiostatin*人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白規(guī)格48T/96T VWF*人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子規(guī)格48T/96T BK*人血管舒緩激肽規(guī)格48T/96T ANG-R-Tie2*人血管生成素受體Tie2規(guī)格48T/96T ANG-R-Tie1*人血管生成素受體Tie1規(guī)格48T/96T ANG-4*人血管生成素4規(guī)格48T/96TSV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T培養(yǎng)N-coR1(Nuclearreceptorco-repressor1)核受體輔助抑制因子(抗原)0.5mgN-coR1(Nuclearreceptorco-repressor1
 NephrinProtein去氧腎上腺素NephrinProtein去氧腎上腺素0.5mgNephrinProtein去氧腎上腺素 Nestin巢蛋白(神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白)(抗原)0.5mgNestin巢蛋白(神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白 Nestin巢蛋白(神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白)(抗原)0.5mgNestin巢蛋白(神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白 Neurocan神經(jīng)粘蛋白抗原Neurocan神經(jīng)粘蛋白抗原0.5mgNeurocan神經(jīng)粘蛋白抗原 neurofasciu-155神經(jīng)束蛋白-155neurofasciu-155神經(jīng)束蛋白-1550.5mgneurofasciu-155神經(jīng)束蛋白-155 神經(jīng)保護(hù)肽Neuroprotectivepeptide/Gly-HN(Nuclear-encodedHumanin[HN(N)]Gly14)神經(jīng)保護(hù)肽0.5mgNeuroprotectivepeptide/Gly-HN(Nuclear-encodedHumanin[HN(N Newcastlediseasevirus雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒)1mlNewcastlediseasevirus雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒注意事項(xiàng):
 ?1.一般客戶拿到SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T培養(yǎng)后,應(yīng)該注意什么?
 客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
 收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
 細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
 (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
 (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
 (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
 (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
 (5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
 (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
 (7)視具體情況而定。
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