產(chǎn)品描述: 細(xì)胞名稱 人羊膜細(xì)胞;WISH圖片 形態(tài)特性上皮細(xì)胞樣 生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng) 特征特性初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜,但隨后通過(guò)同工酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析,證實(shí)該細(xì)胞是HeLa細(xì)胞污染的;角蛋白陽(yáng)性。 培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 傳代方法1:2~1:10傳代;每周換液2次。 傳代情況P180 凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測(cè)培養(yǎng)法(-) STRAmelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18; 同工酶 染色體70~75,有若干變異染色體
 冷凍保存細(xì)胞之方法: 人羊膜細(xì)胞;WISH圖片冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。 冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程: 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)人羊膜細(xì)胞;WISH圖片準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 二.細(xì)胞處理: 1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。 對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法: 方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 AMA*小鼠抗心肌抗體規(guī)格48T/96T dsDNA*小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體規(guī)格48T/96T dsDNA*小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體規(guī)格48T/96T ASMA*小鼠抗平滑肌抗體規(guī)格48T/96T ATR*小鼠抗凝血酶受體規(guī)格48T/96T AT-Ⅲ*小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體規(guī)格48T/96T AECA*小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體規(guī)格48T/96T ADH/AVP*小鼠抗利尿激素/精氨酸加壓素規(guī)格48T/96T TRACP-5b*小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b規(guī)格48T/96T AsAb*小鼠抗抗體規(guī)格48T/96T 人羊膜細(xì)胞;WISH圖片cRaf/Raf1抗原cRaf/Raf1(c-raf1)cRaf/Raf1抗原0.5mgcRaf/Raf1(c-raf1 CREB-1(cAMPresponsiveelementbindingprotein-1)環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(抗原)0.5mgCREB-1(cAMPresponsiveelementbindingprotein-1 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子CRF(Corticotropin-ReleasingFactor)促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子0.5mgCRF(Corticotropin-ReleasingFactor 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子CRF(Corticotropin-ReleasingFactor)促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子0.5mgCRF(Corticotropin-ReleasingFactor C端Cripto-1(C-Terminus)畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)C端0.5mgCripto-1(C-Terminus N端Cripto-1(N-Terminus)畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗原(表皮生長(zhǎng)因子相關(guān)肽)N端0.5mgCripto-1(N-Terminus 降鈣素受體樣蛋白抗原CRLR/CALCRL(calcitoninreceptorlikeprecursor)降鈣素受體樣蛋白抗原0.5mgCRLR/CALCRL(calcitoninreceptorlikeprecursor 二氫嘧啶酶樣2CRMP2抗原CRMP2/Dpysl2(collapsinresponsemediatorprotein-2)二氫嘧啶酶樣2CRMP2抗原0.5mgCRMP2/Dpysl2(collapsinresponsemediatorprotein-2 注意事項(xiàng): ?1.一般客戶拿到人羊膜細(xì)胞;WISH圖片后,應(yīng)該注意什么? 客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。 細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些? (1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā); (2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); (4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā); (5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā); (6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā); (7)視具體情況而定。 |