小鼠嗅鞘細(xì)胞提取物【Mouse Brain: Normal Olfactory Bulb Ensheathing Cells Derivatives】

小鼠嗅鞘細(xì)胞提取物是從小鼠原代嗅鞘細(xì)胞提取的，小鼠原代嗅鞘細(xì)胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

巨細(xì)胞病毒單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒485-Chlorothiophene-carboxylic acid2653

EB病毒單重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒48Rivaroxaban3667892利伐沙班

單純皰疹/巨細(xì)胞病毒雙重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒48D-Tryptophan methyl ester hydrochloride1477

手足口病EV-U/EV71型/CoxA16型病毒三重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒487-Methoxy-naphthaleneacetic acid68362

腮腺炎/乙腦/腸道病毒三重?zé)晒?/span>PCR檢測(cè)試劑盒48Dehydrotolvaptan1379736
HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose  138195-49-0  中文名：  分子式：C29H36O17 

humanphospholipidscramblase1,PLSCR1ELISAKit人0脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17-Acetyloxy-6-chloro-1α-chloromethylpregna-4,6-diene-3,20-dione  中文名：醋酸環(huán)丙氯地孕酮  分子式：C24H30Cl2O4 

HumanPhospholipidaseA2，PL-A2ELISAKit人0脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17-Hydroxy-1a,2a-methylenepregna-4,6-diene-3,20-dione acetate  2701-50-0  中文名：  分子式：C24H30O4 

HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  16-Acetoxy-7-O-acetylhorminone  269742-39-4  中文名：  分子式：C24H32O7 

HumanPhospholipaseC，PLCELISAKit人0酯酶C(PLC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyranosyloxy)-5α-bufa-20,22-dienolide  中文名：  分子式：C30H44O10
戊唑醇  分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 250mg MouseOsteoprotegerin,OPGELISA試劑盒小鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

塞來西布 HPLC≥98% 20mg MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISA試劑盒小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

水楊酸鈉 HPLC≥99% 100mg Mouseovariancancermarker-CA125ELISA試劑盒小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鄰苯二甲酸二正辛酯 GC≥98% 1ml Mouseoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISA試劑盒小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酮康唑 HPLC≥98% 100mg Mouseoxidizidedglathione,GSGSELISA試劑盒小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

恩諾沙星 HPLC≥98% 100mg Mouseoxytocin,OTELISA試劑盒小鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

慶大霉素硫酸鹽 效價(jià)測(cè)定 200mg Mousep53/tumorprotein,p53/TP53ELISA試劑盒小鼠p53(p53)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

磺胺甲噁唑 HPLC≥98% 100mg Mousepara-aminobenzoicacid,PABAELISA試劑盒小鼠對(duì)(PABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲氧芐啶 HPLC≥98% 100mg MouseParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISA試劑盒小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

頭孢哌酮  HPLC≥98% 200mg MousePeosidineELISA試劑盒小鼠戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠嗅鞘細(xì)胞提取物其它天然產(chǎn)物        兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒           

Taxilluside A  中文名：  分子式：C18H24O10  度：97.5%  兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒  

n-Butyl β-D-fructofuranoside  中文名：基-β-D-果糖苷  分子式：C10H20O6  度：97.0%  兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒  

Palmitone  中文名：棕櫚酮  分子式：C31H62O  度：98.0%  兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒  

9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid  中文名：  分子式：C18H30O3  度：95.0%  兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。