冷凍保存細(xì)胞之方法：
人胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90說(shuō)明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 人胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90說(shuō)明書
形態(tài)特性成纖維細(xì)胞

人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701]說(shuō)明書采用干冰運(yùn)輸，經(jīng)過(guò)逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時(shí)停止其生命活動(dòng)，保存其活性，使您的實(shí)驗(yàn)更生動(dòng),公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.
產(chǎn)品描述：
細(xì)胞名稱 人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701]說(shuō)明書
形態(tài)特性上皮樣

生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)

特征特性該細(xì)胞系來(lái)自35歲女性的肝癌癌旁組織。

培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況PN

凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測(cè)陰性

STRAmelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:13.3；D16S539:9,10；D18S51:16；D19S433:13；D21S11:27,28；D2S1338:17；D3S1358:15,18；D5S818:11,12；D7S820:12；D8S1179:12；FGA:18,21；TH01:7；TPOX:12；vWA:16,18

同工酶

染色體
主要功能：
（1）人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701]說(shuō)明書血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2） 表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化：
（1）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701]說(shuō)明書基本特性：
（1）組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

細(xì)胞種類：
*種：
人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701]說(shuō)明書是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
購(gòu)買客戶請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購(gòu)的細(xì)胞名稱、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
以下是人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701]說(shuō)明書的相關(guān)產(chǎn)品,點(diǎn)擊進(jìn)入了解更多人正常組織來(lái)源細(xì)胞。
TGF-α*小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α規(guī)格48T/96T

H-2Ⅲ*小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類規(guī)格48T/96T

MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISAKit，48T/96T*小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類規(guī)格48T/96T

MHCⅠ/H-2Ⅰ*小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類規(guī)格48T/96T

TSGF*小鼠腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子規(guī)格48T/96T

TRAIL-R4*小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4規(guī)格48T/96T

TRAIL-R3*小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3規(guī)格48T/96T

TRAIL-R1*小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1規(guī)格48T/96T

TNFsR-Ⅱ*小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ規(guī)格48T/96T

TNFsR-Ⅰ*小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ規(guī)格48T/96T
人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701]說(shuō)明書AU5tagAU5tag標(biāo)簽抗原AU5tagAU5tag標(biāo)簽抗原0.5mgAU5tagAU5tag標(biāo)簽抗原

AuroraB極光激酶B抗原AuroraB極光激酶B抗原0.5mgAuroraB極光激酶B抗原

精氨酸加壓素受體2抗原AVPR2(argininevasopressinreceptor2)精氨酸加壓素受體2抗原0.5mgAVPR2(argininevasopressinreceptor2

B7-H1/PDL1/CD274(programmeddeathligand1)程序性死亡配體1（多肽）0.5mgB7-H1/PDL1/CD274(programmeddeathligand1

B7-H4B7-H4（抗原）0.5mgB7-H4B7-H4（抗原

BACE(ASP2)β分泌酶（抗原）0.5mgBACE(ASP2

Bacillusanthraci炭疽桿菌菌體蛋白Bacillusanthraci炭疽桿菌菌體蛋白0.5mgBacillusanthraci炭疽桿菌菌體蛋白

相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原Bad(BCL-xL/BCL-2-associateddeathpromoter)相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗原0.5mgBad(BCL-xL/BCL-2-associateddeathpromoter
收到人肝細(xì)胞；QSG-7701 [QSG7701]說(shuō)明書如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。

生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)

特征特性W.W.Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材，建立了人二倍體成纖維細(xì)胞株IMR-90。[22381]分裂潛能，病毒感受性和其它性質(zhì)都得到了充分研究，因而這株細(xì)胞可以作為WI-38或其它標(biāo)準(zhǔn)人肺細(xì)胞株的替代株。有報(bào)道稱這株細(xì)胞在表現(xiàn)出衰老前可倍增58次。[22381]

培養(yǎng)條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。

傳代情況P(11+5)

凍存條件*培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測(cè)陰性

STR

同工酶

染色體

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）人胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90說(shuō)明書準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項(xiàng)：
?1.一般客戶拿到人胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90說(shuō)明書后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
GHRH*豬促生長(zhǎng)激素釋放激素規(guī)格48T/96T

FSH*豬促卵泡素規(guī)格48T/96T

TRH*豬促甲狀腺素釋放激素規(guī)格48T/96T

E*豬雌激素規(guī)格48T/96T

ER*豬雌二醇受體規(guī)格48T/96T

E2*豬雌二醇規(guī)格48T/96T

TGEV*豬傳染性胃腸炎病毒抗體規(guī)格48T/96T

SOD*豬超氧化物歧化酶規(guī)格48T/96T

C3*豬補(bǔ)體蛋白3規(guī)格48T/96T

EGF*豬表皮生長(zhǎng)因子規(guī)格48T/96T
人胚肺成纖維細(xì)胞；IMR-90說(shuō)明書α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原Alpha-AF/Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase)α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原0.5mgAlpha-AF/Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase

人α亞基人絨毛膜促性腺激素多肽抗原Alpha-HCG(HumanchorionicgonadotropinAlpha)人α亞基人絨毛膜促性腺激素多肽抗原0.5mgAlpha-HCG(HumanchorionicgonadotropinAlpha

Alpha-Synuclein核突觸蛋白（抗原）0.5mgAlpha-Synuclein核突觸蛋白（抗原

Alpha-Synuclein核突觸蛋白（抗原）0.5mgAlpha-Synuclein核突觸蛋白（抗原

AM(Adrenomedullin;ADM)腎上腺髓質(zhì)素（多肽抗原）0.1mgAM(Adrenomedullin;ADM

α－甲基?；o酶A消旋酶抗原AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoAracemase)α－甲基?；o酶A消旋酶抗原0.5mgAMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoAracemase

AMH/MISMuellerian抑制因子抗原AMH/MISMuellerian抑制因子抗原1mgAMH/MISMuellerian抑制因子抗原

腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原AMPKBeta1(AMP-activatedProteinKinasebeta-1)腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗原0.5mgAMPKBeta1(AMP-activatedProteinKinasebeta-1