大鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)測定中,存在眾多的干擾因素及影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷,這給實(shí)驗(yàn)者在一定程度上帶來了極大的困擾,今天小編在這里為大家分析下ELISA實(shí)驗(yàn)過程中內(nèi)源性的干擾因素。內(nèi)源性干擾因素一般包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體、因使用鼠抗體治療或診斷誘導(dǎo)的抗鼠Ig抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)等。在日常的臨床血清(漿)標(biāo)本中,有相當(dāng)比例不同程度的含有上述各種干擾物質(zhì),從而導(dǎo)致測定結(jié)果的假陽性。 1、稀釋標(biāo)本:這在判斷急性病原體感染的特異IgM抗體如抗HAVIgM,抗HBclgM, TORCH的IgM抗體檢驗(yàn)等尤為有用。因?yàn)楦腥緯r(shí),血循環(huán)中特異的IgM抗體滴度通常很高,而RF滴度通常相對(duì)要低得多。因此,在測定前對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,特異的IgM因高滴度存在仍可檢出,而非特異的RF則會(huì)因?yàn)橄♂屪兂煞浅5偷牡味龋瑥亩鴮?duì)測定幾乎不產(chǎn)生干擾?,F(xiàn)在,有些特異IgM檢測elisa試劑盒不要求稀釋標(biāo)本,直接檢測,這樣雖然方便了實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員的操作,但容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果,并且由于某些感染,如HBV的感染,血循環(huán)中抗HBelgM可持續(xù)以一定的滴度存在,標(biāo)本不做稀釋即進(jìn)行檢測,即可出現(xiàn)陽性結(jié)果,從而失去抗HBclgM用于HBV感染的診斷價(jià)值。因此,在臨床實(shí)驗(yàn)室,一定要使用要求對(duì)標(biāo)本做1:1000稀釋的試劑盒進(jìn)行檢驗(yàn),從而保證相應(yīng)檢測項(xiàng)目結(jié)果的可靠性及臨床應(yīng)用價(jià)值。 2、改變酶標(biāo)抗體:由于RF結(jié)合的是IgG的Fc片段,如果將待酶標(biāo)的抗體的F,片段酶切夫除,僅留下具有特異結(jié)合功能的F(ab’)2部分標(biāo)記酶,則在測定中即可避免RF的干擾。 3、標(biāo)本中RF用變性IgG預(yù)先封閉:將經(jīng)熱變性(63℃,10min)的動(dòng)物如兔、羊等的IgG加入到標(biāo)本稀釋液中,或是將該變性IgG連接至一顆粒固相如聚苯乙烯微球或微孔,然后加入臨床血清標(biāo)本,反應(yīng)后,再吸出標(biāo)本進(jìn)行檢測。此外,在測定特異IgM時(shí),也可使用抗人IgG去除臨床標(biāo)本中RF和IgG。 4、大鼠elisa試劑盒測定抗原時(shí),可在標(biāo)本中加入可使RF降解的還原劑:如2—巰基乙醇。2—巰基乙醇等還原劑可使抗體內(nèi)的巰基裂解,因而可以去除RF的干擾,但只適用于抗原測定。 5、包被或酶標(biāo)二抗使用特異的雞抗體IgY:RF不與雞IgY反應(yīng),如果包被和酶標(biāo)二抗均為雞IgY抗體,則不受標(biāo)本中RF的干擾。 100mg Hexacosanol 506-52-5 二十六碳醇標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Guanine 29110-48-3 鳥嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Goserelin Acetate 145781-92-6 醋酸戈舍瑞林標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Glutamine 56-85-9 谷氨酰胺標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Formoterol Fumarate 183814-30-4 富馬酸福莫特羅標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Fluticasone Propionate 80474-14-2 氟替卡松丙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Flurandrenolide 1524-88-5 氟氫縮松標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Fluocinonide 356-12-7 醋酸氟輕松標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Fluocinolone Acetonide 67-73-2 醋酸膚輕松標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Fludeoxyglucose 29702-43-0 2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 100mg Fenbendazole 43210-67-9 苯硫咪唑標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠elisa試劑盒 |