大鼠elisa試劑盒實驗測定中,存在眾多的干擾因素及影響實驗結(jié)果的判斷,這給實驗者在一定程度上帶來了極大的困擾,今天小編在這里為大家分析下ELISA實驗過程中內(nèi)源性的干擾因素。內(nèi)源性干擾因素一般包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體、因使用鼠抗體治療或診斷誘導(dǎo)的抗鼠Ig抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)等。在日常的臨床血清(漿)標本中,有相當比例不同程度的含有上述各種干擾物質(zhì),從而導(dǎo)致測定結(jié)果的假陽性。 1、稀釋標本:這在判斷急性病原體感染的特異IgM抗體如抗HAVIgM,抗HBclgM, TORCH的IgM抗體檢驗等尤為有用。因為感染時,血循環(huán)中特異的IgM抗體滴度通常很高,而RF滴度通常相對要低得多。因此,在測定前對標本進行稀釋,特異的IgM因高滴度存在仍可檢出,而非特異的RF則會因為稀釋變成非常低的滴度,從而對測定幾乎不產(chǎn)生干擾。現(xiàn)在,有些特異IgM檢測elisa試劑盒不要求稀釋標本,直接檢測,這樣雖然方便了實驗室技術(shù)人員的操作,但容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果,并且由于某些感染,如HBV的感染,血循環(huán)中抗HBelgM可持續(xù)以一定的滴度存在,標本不做稀釋即進行檢測,即可出現(xiàn)陽性結(jié)果,從而失去抗HBclgM用于HBV感染的診斷價值。因此,在臨床實驗室,一定要使用要求對標本做1:1000稀釋的試劑盒進行檢驗,從而保證相應(yīng)檢測項目結(jié)果的可靠性及臨床應(yīng)用價值。 2、改變酶標抗體:由于RF結(jié)合的是IgG的Fc片段,如果將待酶標的抗體的F,片段酶切夫除,僅留下具有特異結(jié)合功能的F(ab’)2部分標記酶,則在測定中即可避免RF的干擾。 3、標本中RF用變性IgG預(yù)先封閉:將經(jīng)熱變性(63℃,10min)的動物如兔、羊等的IgG加入到標本稀釋液中,或是將該變性IgG連接至一顆粒固相如聚苯乙烯微球或微孔,然后加入臨床血清標本,反應(yīng)后,再吸出標本進行檢測。此外,在測定特異IgM時,也可使用抗人IgG去除臨床標本中RF和IgG。 4、大鼠elisa試劑盒測定抗原時,可在標本中加入可使RF降解的還原劑:如2—巰基乙醇。2—巰基乙醇等還原劑可使抗體內(nèi)的巰基裂解,因而可以去除RF的干擾,但只適用于抗原測定。 5、包被或酶標二抗使用特異的雞抗體IgY:RF不與雞IgY反應(yīng),如果包被和酶標二抗均為雞IgY抗體,則不受標本中RF的干擾。 100mg Hexacosanol 506-52-5 二十六碳醇標準品 100mg Guanine 29110-48-3 鳥嘌呤標準品 100mg Goserelin Acetate 145781-92-6 醋酸戈舍瑞林標準品 100mg Glutamine 56-85-9 谷氨酰胺標準品 100mg Formoterol Fumarate 183814-30-4 富馬酸福莫特羅標準品 100mg Fluticasone Propionate 80474-14-2 氟替卡松丙酸酯標準品 100mg Flurandrenolide 1524-88-5 氟氫縮松標準品 100mg Fluocinonide 356-12-7 醋酸氟輕松標準品 100mg Fluocinolone Acetonide 67-73-2 醋酸膚輕松標準品 100mg Fludeoxyglucose 29702-43-0 2-脫氧-2-氟-D-葡萄糖標準品 100mg Fenbendazole 43210-67-9 苯硫咪唑標準品 大鼠elisa試劑盒 |