食油假單胞菌 血清/培養(yǎng)基菌種保藏方法： 1.斜面低溫保藏法 產(chǎn)品僅用于科研將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上，待菌種生長*后，置于4℃左右的冰箱中保藏，每隔一定時(shí)間（保藏期）再轉(zhuǎn)接至新的斜面培養(yǎng)基上，生長后繼續(xù)保藏，如此連續(xù)不斷。此法簡便易行，容易推廣，存活率高，故科研和上對(duì)經(jīng)常使用的菌種大多采用這種保藏方法。 2.石蠟油封藏法 此法是在無菌條件下，將滅過菌并已蒸發(fā)掉水分的液體石蠟倒入培養(yǎng)成熟的菌種斜面（或半固體穿刺培養(yǎng)物）上，石蠟油層高出斜面頂端lcm，使培養(yǎng)物與空氣隔絕，加膠塞并用固體石蠟封口后，垂直放在室溫或4℃冰箱內(nèi)保藏。由于液體石蠟阻隔了空氣，使菌體處于缺氧狀態(tài)下，而且又防止了水分揮發(fā)，使培養(yǎng)物不會(huì)干裂，因而能使保藏期達(dá)～2年，或更長。但此法不適合厭氧性細(xì)菌。 3.砂土管保藏法 適用于產(chǎn)孢子的放線菌、霉菌及形成芽孢的細(xì)菌，對(duì)于一些對(duì)干燥敏感的細(xì)菌如奈氏球菌、弧菌和假單胞桿菌及酵母則不適用。砂土管法兼具低溫、干燥、隔氧和無營養(yǎng)物等諸條件，故保藏期較長、效果較好，且微生物移接方便，經(jīng)濟(jì)簡便。它比石蠟油封藏法的保藏期長，約～0年。 4.麩皮保藏法 此法以麩皮作為載體，吸附接入的孢子，然后在低溫干燥條件下保存。適用于產(chǎn)孢子的霉菌和某些放線菌，保藏期在年以上。因操作簡單，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，工廠較多采用。 5.冷凍真空干燥保藏法 簡稱凍干法，通常采用保護(hù)劑制備擬保藏菌種的細(xì)胞懸液或孢子懸液于安瓿管中，再在低溫下快速將含菌樣凍結(jié)，并減壓抽真空，使水升華將樣品脫水干燥，形成*干燥的固體菌塊。并在真空條件下立即融封，造成無氧真空環(huán)境，置于低溫下，使微生物處于休眠狀態(tài)，而得以保藏。常用的保護(hù)劑有脫脂牛奶、血清、淀粉、葡聚糖等高分子物質(zhì)。 6.液氮超低溫保藏法 以甘油、二甲基亞砜等作為保護(hù)劑，在液氮超低溫（-96℃）下保藏。其主要原理是菌種細(xì)胞從常溫過渡到低溫，并在降到低溫之前，使細(xì)胞內(nèi)的自由水通過細(xì)胞膜外滲出來，以免膜內(nèi)因自由水凝結(jié)成冰晶而使細(xì)胞損傷。此法操作簡便、高效、保藏期一般可達(dá)到5年以上，是目前被*的效的菌種保藏技術(shù)之一。 |
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