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UACC812細(xì)胞人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)預(yù)準(zhǔn)備
點(diǎn)擊次數(shù):535 更新時(shí)間:2023-12-06

UACC812細(xì)胞人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)預(yù)準(zhǔn)備:


首先是準(zhǔn)備各種溶液。


*是配制溶液過(guò)程中要用到的水。水用純水,高壓滅菌之后,再去內(nèi)毒素。去內(nèi)毒素方法很多,*簡(jiǎn)單可以放在烘箱180度3小時(shí)。或者過(guò)去內(nèi)毒素的柱子后,高壓滅菌。


第二,各種溶液滅菌:


抗生素用去內(nèi)毒素水配制后,直接過(guò)濾除菌(過(guò)0.22u濾頭)??梢杂靡淮涡詿o(wú)菌注射器過(guò)一次性0.22u濾頭。


現(xiàn)在用的培養(yǎng)液,如果是商業(yè)化液體培養(yǎng)基,不用處理。如果是粉末,需要用去內(nèi)毒素水在生物安全柜(或凈工作臺(tái))進(jìn)行配制,再過(guò)濾除菌??梢韵扰錆饪s液(如10×),過(guò)濾除菌后。再用滅菌去內(nèi)毒素水稀釋成1×培養(yǎng)液。


第三,培養(yǎng)液的配制:


培養(yǎng)液加上合適比例的血清即可。但血清一般保存于-20℃,一般解凍是放在4℃冰箱解凍,耗時(shí)長(zhǎng),而且必須解決之后,才能進(jìn)行培養(yǎng)基的配制。所以要提前幾個(gè)小時(shí)就將血清從-20℃轉(zhuǎn)入4℃,以期解凍。當(dāng)然如果這一次就需要用完的話(是指用這些血清配制的培養(yǎng)液都用完),也可以放到37℃解凍。


第四,*重要的是保證過(guò)程中無(wú)菌。


液體必須要分裝。無(wú)論過(guò)程中用到的培養(yǎng)液、血清、PBS、生理鹽水、抗生素盡量分裝。分裝是為了防止污染。如果操作有誤,僅能威脅到其中一支,而非整個(gè)。


培養(yǎng)液、血清、PBS、生理鹽水分裝為20mL、50mL或100mL/管


抗生素可分裝為1mL/管。


分裝*先于UACC812細(xì)胞人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞細(xì)胞操作


第五,操作之前,培養(yǎng)液先放到37度的細(xì)胞培養(yǎng)箱里復(fù)溫。原因:盡量減少對(duì)細(xì)胞的刺激。低溫對(duì)于細(xì)胞也是一個(gè)刺激因素。


第六,操作之前,大腦先過(guò)一遍此次操作所需要用到的所有用具。將所有用具先放到無(wú)菌臺(tái)面上。減少拿入拿出的動(dòng)作,保證無(wú)菌。(如果萬(wàn)一發(fā)現(xiàn)少拿了什么,也不要緊,再加上就是。如果是槍頭盒、移液管等用具,*先用消毒酒精噴一下)。


第七,操作之前,帶著的手套先噴消毒酒精。然后再進(jìn)入工作臺(tái)。等一分鐘,等手套上的酒精揮發(fā)之后再進(jìn)行操作。


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