微纖絲相關(guān)糖蛋白抗體抗體分子標(biāo)記技術(shù)：
（一）原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為殘基,殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
（二）準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；
（三）操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行；
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；
6.碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。 GCP-2/CXCL6 ELISA Kit乳腺癌易感基因復(fù)合蛋白4抗體粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒 GM-CSF Ab ELISA Kit紡錘體檢查點蛋白抗體粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子抗體(GM-CSF Ab)ELISA試劑盒 GM-CSF ELISA Kit有絲分裂檢驗點蛋白BubR1抗體粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒 G-CSF ELISA Kit乳腺癌相關(guān)蛋白3抗體粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒 Leishimaria Ab ELISA Kit乳腺癌相關(guān)蛋白2抗體利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA試劑盒 ANP ELISA Kit乳腺癌抗雌激素耐藥蛋白1利鈉肽(ANP)ELISA試劑盒 KP ELISA Kit胞漿支鏈氨基酸酸轉(zhuǎn)氨酶抗體利鉀尿肽(KP)ELISA試劑盒 CIRBP ELISA Kit磷酸化乳腺癌抗雌激素耐藥蛋白1抗體冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白(CIRBP)ELISA試劑盒 CG ELISA Kit促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒 ORM2 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體類粘蛋白2(ORM2)ELISA試劑盒 ORM ELISA Kit甲狀腺激素受體共激活蛋白抗體類粘蛋白(ORM)ELISA試劑盒 LOC382344 ELISA Kit磷酸化促凋亡Bik蛋白抗體類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA試劑盒 TN ELISA Kit磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體類肌腱蛋白(TN)ELISA試劑盒 SCA ELISA Kit磷酸化Bax抗體類固醇細(xì)胞抗體(SCA)ELISA試劑盒 RF ELISA KitBcl-10抗體類風(fēng)濕因子(RF)ELISA試劑盒 HLA-G ELISA Kit原癌基因Bcl-6抗體類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒
|
