HPV DNA 的PCR擴(kuò)增 評價HPV檢測方法zui關(guān)鍵的因素是檢測靈敏度，以基因擴(kuò)增為基礎(chǔ)檢測HPV DNA，是目前zui靈敏的檢測方法，可檢測出低水平的病毒感染，并且能夠比較準(zhǔn)確地對HPV感染狀態(tài)進(jìn)行分類，因此成為實驗室和流行病學(xué)研究的理想工具。但是，由于基因擴(kuò)增過程中污染造成的假陽性及技術(shù)成本高，目前不宜作為臨床實驗室HPV感染的常規(guī)檢測。ELISA試劑盒 熒光定量PCR (FQ-PCR) 技術(shù) FQ-PCR是1995年由美國Perkin Flmer公司研制成功的一種新型核酸定量檢測方法，該法將普通PCR的高靈敏性、DNA雜交的高特異性和光譜技術(shù)的高性有機(jī)結(jié)合，克服了傳統(tǒng)PCR在許多方面的缺點和局限性。由于熒光探針的引入，而且被釋放的熒光基團(tuán)數(shù)目與PCR產(chǎn)物數(shù)量相同，使得該方法對DNA模板定量的準(zhǔn)確性與特異性都有很大提高。常用的PCR擴(kuò)增儀與傳統(tǒng)PC R擴(kuò)增儀相比，應(yīng)用更廣泛、定量測量、檢測效率明顯提高、擴(kuò)增產(chǎn)物無需電泳分析、無管道內(nèi)污染及結(jié)果重復(fù)性好等特點。由于HPV-16型特異引物可與HPV66型模板DNA發(fā)生錯配，傳統(tǒng)PCR法擴(kuò)增時，常對兩者的擴(kuò)增產(chǎn)物不易區(qū)分而造成HPV 16假陽性結(jié)果，但應(yīng)用FQ-PCR技術(shù)，HPV 66型DNA不能擴(kuò)增，從而增強了HPV分型檢測的特異性。此外，F(xiàn)Q-PCR技術(shù)檢測HPV感染的敏感性較傳統(tǒng)PCR法增高，當(dāng)HPV16, 18, 31, 33, 35亞型含量平均為1拷貝基因組/300個細(xì)胞時，即可用此法檢測到。ELISA試劑盒 |
