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原位雜交組織對照
點擊次數(shù):1371 更新時間:2015-07-22


   為證明原位雜交實驗操作的準確性和實驗結果的可靠性,必須設置一系列對照實驗。對照實驗的設置應根據(jù)核酸探針和靶核酸的種類以及現(xiàn)有的可能條件選定。一般應在下述幾種對照實驗中選擇3~4種,以證實雜交結果的可信性。
 
    組織對照

    1.Southern或Northern印跡反應  原位雜交能在組織細胞原位顯示待測核酸(DNA或RNA)的存在。為了進一步證實原位雜交所顯示的核酸是否存在于被檢組織內,可從被檢組織中提取DNA或總RNA,然后分別用Southern或Northern印跡法進行檢測。一般情況下,Southern或Northern印跡反應結果與原位雜交結果一致,兩者互相支持。但是,當陽性細胞在被檢的組織中所占比例很小時,原位雜交結果可能為陽性,而印跡反應則由于靶核酸的含量太低而呈陰性結果。

    2.免疫組織化學  如果能獲得靶基因產(chǎn)物抗體,可結合免疫組織化學方法,從蛋白質(或多肽)水平在相鄰切片或同一切片中證明蛋白 質(或多肽)和相應的mRNA共存于同一細胞中。

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