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血漿游離血紅蛋白測定實(shí)驗(yàn)原理

血紅蛋白具有類過氧化物酶活性，可催化H2O2釋放新生態(tài)氧，使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化，由無色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，可測出其含量。

實(shí)驗(yàn)方法

材料：
1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2．1%H2O2
3．10%醋酸溶液
4．分光光度計
方法：
1.抽取靜脈血2-3ml，枸櫞酸鈉抗凝，離心分離血漿。

2．按下表進(jìn)行操作，用分光光度計，波長為530nm，以空白管調(diào)零，測定測定管的吸光度。

試劑 （ml）
測定管
空白管
2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
0.5
0.5
患者血漿
0.02
/
1% H2O2
0.5
0.5
混勻后室溫放置10min
10%醋酸溶液
5.0
5.0
室溫放置10min

3.蛋白計算公式

血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100

實(shí)驗(yàn)結(jié)果計算

參考范圍：0-40mg/L